頂空毛細(xì)管柱氣相色譜法分析測(cè)定藥品中殘留溶媒

          鄧  青                              鄧  嵐    

（云南省分析測(cè)試研究所 昆明 650051）        （云南大學(xué)微生物研究所 昆明 650091）

摘要  目的：建立一種快速測(cè)定藥品中殘留溶媒的分析方法。方法：采用自動(dòng)頂空取樣，氣相色譜毛細(xì)管柱分離，內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)相結(jié)合的方法分析測(cè)定藥品中常見的五種殘留溶媒（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）。結(jié)果：分析測(cè)定回收率為99.37～101.04%。變異系數(shù)為1.75～2.36%。結(jié)論：頂空毛細(xì)管柱氣相色譜法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確是測(cè)定藥品中殘留溶媒較為理想的方法。

關(guān)鍵詞：頂空進(jìn)樣，毛細(xì)管柱氣相色譜，定量測(cè)定，藥品，殘留溶媒 

    藥品中殘留溶媒是指在合成原料藥，輔料或制劑生產(chǎn)的過程中使用或產(chǎn)生的揮發(fā)性有機(jī)化學(xué)物質(zhì)。它們?cè)趯?shí)際的生產(chǎn)中未能被*地清除。近年來，藥品中殘留有機(jī)溶劑的毒性和致癌作用日益引起各方面的重視。藥品中殘留有機(jī)溶劑于1997年被美國(guó)FDA列為藥品監(jiān)控項(xiàng)目。我國(guó)藥品中殘留有機(jī)溶劑檢測(cè)也越來越受到有關(guān)方面的重視［1］。為適應(yīng)我國(guó)醫(yī)藥工業(yè)隨著WTO進(jìn)入市場(chǎng)的需要，提高藥品的使用安全性，開展和完善藥品中殘留有機(jī)溶劑檢測(cè)工作勢(shì)在必行。本文初步研究探索采用頂空毛細(xì)管柱氣相色譜法分析藥品中殘留揮發(fā)性有機(jī)溶劑。頂空氣相色譜法只將揮發(fā)和半揮發(fā)的組份引入柱子，可避免非揮發(fā)性的物質(zhì)對(duì)系統(tǒng)的污染，樣品前處理簡(jiǎn)便，分析效率高。結(jié)果表明，本方法快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

1 實(shí) 驗(yàn) 部 分

1.1  分析設(shè)備及條件  

美國(guó)PE-8700氣相色譜儀；FID檢測(cè)器；美國(guó)PE 公司HS-6B頂空進(jìn)樣器；澳大利亞SGE公司SE-54彈性石英毛細(xì)管柱，內(nèi)徑0.32mm，長(zhǎng)30米，膜厚1.0μm；本文實(shí)驗(yàn)使用的頂空進(jìn)樣器采用壓力平衡進(jìn)樣原理，進(jìn)樣量采用時(shí)間開關(guān)連續(xù)調(diào)節(jié)，研究摸索的分析參數(shù)條件如表一：

1.2  化學(xué)試劑及溶液配制  

樣品分析溶劑DMF（N·N一二甲基甲酰胺）， 分析殘留溶媒組分（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）及內(nèi)標(biāo)正丙醇均為分析純?cè)噭?/font>

內(nèi)標(biāo)溶液：準(zhǔn)確移取50.0μl正丙醇于100ml容量瓶中，用DMF定容。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確移取甲醇、丙酮、二氯甲烷各50.0μl，苯、甲苯各30.0μl于100ml容量瓶中用DMF定容。

標(biāo)準(zhǔn)溶液：取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml內(nèi)標(biāo)溶液各5.0μl于25.0ml容量瓶中用DMF定容。分別取2.0ml于頂空瓶?jī)?nèi)密封，備GC分析用。

樣品溶液： 準(zhǔn)確稱取樣品1.500g于25.0ml容量瓶中，加入5.0ml內(nèi)標(biāo)溶液, 用

DMF定容。取2.0ml于頂空瓶?jī)?nèi)密封，備GC分析。

表1:氣相色譜和頂空進(jìn)樣器條件

Table 1: gas chromatographic and headspace autosampler  conditions

1.3  系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試   

頂空氣相色譜法分析要研究摸索兩部分：頂空和氣相色譜的分析條件參數(shù)，除常規(guī)毛細(xì)管柱氣相色譜分析所需要的各種條件參數(shù)，頂空條件參數(shù)研究涉及樣品溶劑極性、沸點(diǎn)、頂空平衡溫度、平衡時(shí)間、頂空取樣量等因素的影響［2］。分析結(jié)果的準(zhǔn)確度，靈敏度和精密度與各個(gè)條件參數(shù)的選擇均有關(guān)。因此系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試［3］，是頂空氣相色譜分析方法研究中的不可少的部份。它可以核查頂空氣相色譜系統(tǒng)的分析結(jié)果是否穩(wěn)定可靠。按本文研究選擇的條件參數(shù)進(jìn)行分析，由譜圖可測(cè)出，任何兩個(gè)組份的分離度R值都大于1.5。從六次隨機(jī)的進(jìn)樣獲取的各檢測(cè)組分的保留時(shí)間見表二, 其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%。測(cè)試結(jié)果表明本分析方法滿足此藥品中揮發(fā)性殘留有機(jī)溶劑分析的系統(tǒng)適應(yīng)性要求。

表2：揮發(fā)性有機(jī)溶劑組份保留時(shí)間、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及沸點(diǎn)，（n=6）

Tab 1:  residual organic volatile dissolution media 

（RT：retention time， RSD：relative standard deviation， BP：boiling point）

2   結(jié) 果 與 討 論

2.1  采用上述條件頂空進(jìn)樣分析測(cè)定藥品中的殘留揮發(fā)性有機(jī)溶劑氣相色譜結(jié)果，見譜圖一。

圖1：藥品中殘留溶媒氣相色譜圖

Fig.1: Gas chromatogram of residual dissolution media in pharmaceuticals

2.2  精密度及回收率測(cè)試見表三。由分析結(jié)果可以得出，采用內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)結(jié)合的方法定量，避免分析中殘留有機(jī)溶劑揮發(fā)量難以控制的問題，分析結(jié)果顯示頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜是一種簡(jiǎn)便、快速（色譜分析僅13min）、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的分析藥品中揮發(fā)性殘留有機(jī)溶劑的方法。

表3 ：  樣品測(cè)定及精密度和回收率測(cè)試結(jié)果（n=6）

Tab 3 :  Results of samples determination and recoveries:

參考文獻(xiàn)：

１、 李眉  馬玉楠．簡(jiǎn)介ICP關(guān)于藥品中溶劑殘留量的指導(dǎo)原則．藥學(xué)進(jìn)展，1998，1（3）：119-120

２、 林炳承 等. HS-6B頂空進(jìn)樣器的性能考察及其應(yīng)用. 分析測(cè)試通報(bào)，1991，10（5）：17-21

３、 USP.  X X Ⅲ.  （1995）

Determination of Residual Dissolution Media in Pharmaceuticals by Headspace Capillary Gas Chromatography

Deng      Qing

Yunnan Province Analytic and Testing Research Institute, Kunming, 650051

Deng      Lang

Yunnan University Yunnan Institute of Microbiology, Kunming 650091

Abstract  Objective : To establish the method for determination of residual organic volatile dissolution media in pharmaceuticals. Method: Headspace capillary gas chromatography only introduces volatile and semi-volatile components onto the column, which prevents contamination of the system with non-volatile material. Sample pretreatment is simplified. Analysis efficiency is enhanced. In the present work, headspace injection, capillary analyst and determination by the internal standard and the external standard method was employed together. Results: The recovery  were 99.37─101.04% and the relative  standard  deviations were 1.75─2.36%. Conclusions: This method is fast, reproducible and accurate. Therefore, the automatic headspace gas chromatographic is an ideal approach for the analysis determination of residual dissolution media in pharmaceuticals.

Keywords: Headspace GC,  quantitative analysis,  pharmaceuticals,  residual dissolution media