如何選擇熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)GFP,F(xiàn)ITC,RFP
綠色熒光蛋白(GFP):
綠色熒光蛋白(GFP),是一個(gè)由約238個(gè)氨基酸組成蛋白質(zhì),從藍(lán)光到紫外線都能使其激發(fā),發(fā)出綠色螢光,在細(xì)胞生物學(xué)分子生物學(xué)中,綠色螢光蛋白(GFP)基因常用做報(bào)告基因。綠色螢光蛋白基因可以克隆到脊椎動(dòng)物(例如:兔子)上進(jìn)行表現(xiàn),并拿來(lái)映證某種假設(shè)的實(shí)驗(yàn)方法。通過(guò)基因工程技術(shù),綠色螢光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)進(jìn)不同物種的基因組,在后代中持續(xù)表達(dá)?,F(xiàn)在,綠色螢光蛋白(GFP)基因已被導(dǎo)入并表達(dá)在許多物種,包括細(xì)菌,酵母和其他真菌,魚(yú)(例如斑馬魚(yú)),植物,蒼蠅,甚至人等哺乳動(dòng)物的細(xì)胞。
如何選擇熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)(GFP,F(xiàn)ITC,RFP ......)
LUYOR提供五種不同的熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)光源,配有經(jīng)濟(jì)型體視顯微鏡熒光適配器和便攜式雙熒光蛋白激發(fā)光源。這些可用于激發(fā)多種熒光團(tuán)。此頁(yè)面提供有關(guān)為您的應(yīng)用選擇正確波長(zhǎng)組的指導(dǎo)。
表 1列出了LUYOR波長(zhǎng)組,包括激發(fā)范圍的強(qiáng)烈部分和成對(duì)發(fā)射濾光片的截止值。
表2 列出了我們推薦用于各種熒光蛋白和染料的波長(zhǎng)組。如果您沒(méi)有在列表中看到您的熒光團(tuán),請(qǐng)告訴我們,我們將添加它。如果您發(fā)現(xiàn)任何錯(cuò)誤或可以根據(jù)您的個(gè)人經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)證效果,請(qǐng)同時(shí)告訴我們。
我們的建議基于熒光團(tuán)的工作知識(shí) - 我們自己或客戶的反饋 - 或已公布的光譜數(shù)據(jù)。
表一:熒光蛋白的波長(zhǎng)組
發(fā)光顏色 | 激發(fā) | 發(fā)射 | 適用于 |
UV - 紫外線 | 360 - 380nm | 415nm長(zhǎng)波通 | Dapi |
VI - 紫羅蘭 | 400 - 415nm | 450nm長(zhǎng)波通 | 藍(lán)色熒光蛋白 青色熒光蛋白 |
RB - 藍(lán) | 440-460nm | 500nm長(zhǎng)波通 | 綠色熒光蛋白 |
RB - 藍(lán) | 440-460nm | 500 - 560nm帶通 | 綠色熒光蛋白 |
CY - 青色 | 490 - 515nm | 550nm長(zhǎng)波通 | 黃色熒光蛋白 |
GR - 綠色 | 510 - 540nm | 600nm長(zhǎng)波通 | 紅色熒光蛋白 |
熒光蛋白和熒光物質(zhì)的激發(fā)波長(zhǎng)的選擇
Fluorescent Protein/Dye | UV(紫外線) | VI (紫色) | RB(藍(lán)色) | CY(青色) | GR(綠色) |
Alexa Fluor 488 | √ | ||||
Alexa Fluor 555 | √ | ||||
Alexa Fluor 568 | √ | ||||
Alexa Fluor 594 | √ | ||||
amCyan1 | √ | ||||
Aquamarine | √ | ||||
Calcein | √ | ||||
Cerulean | √ | ||||
CFP | √ | ||||
Citrine | √ | ||||
Clover | √ | ||||
Cy3 | √ | ||||
CyOFP1 | √ | ||||
CyPet | √ | ||||
DAPI | √ | ||||
DASPEI | √ | ||||
Dextran-FITC | √ | ||||
Dextran-Texas Red | √ | ||||
Dextran-TRITC | √ | ||||
DiI | √ | ||||
DsRed | 2 | 推薦 | |||
DsRed Dimer2 | √ | ||||
E2-Orange | √ | ||||
EBFP | √ | ||||
EBFP2 | √ | ||||
ECFP | √ | ||||
EGFP | √ | ||||
eqFP670 | √ | ||||
EYFP | √ | ||||
FAM (fluorescein) | √ | ||||
FITC | √ | ||||
Fluorescein | √ | ||||
FusionRed | X | ||||
Fluorescent Protein/Dye | UV | VI | RB | CY | GR |
GFP | √ | ||||
Hoechst | √ | ||||
iFP1.4 | 推薦 | 2 | |||
KO1 | √ | ||||
LSSmOrange | √ | ||||
Lucifer Yellow | √ | ||||
mAmetrine | √ | ||||
mApple | √ | ||||
mAzamiGreen | √ | ||||
mBanana |
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