細胞計數(shù)采用的方法?
傳統(tǒng)方法:臺盼藍染色法
臺盼藍染色是對死活細胞進行分別計數(shù)的方法之一,染色原理是臺盼藍不能透過活細胞完整的細胞膜,故活細胞不著色;而死亡細胞的細胞膜損傷,染料透過細胞膜在細胞內富集而使細胞著藍色。不過,臺盼藍染色并不一定能準確分辨有核細胞和細胞碎片,因此它往往低估細胞總數(shù)而高估細胞活力。
熒光細胞計數(shù)方法
吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色原理:活細胞經(jīng)AO染色發(fā)出綠色熒光,而死細胞經(jīng)PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是,對背景復雜的細胞,比如說外周血單個核細胞,含有細胞碎片較多或成簇的細胞計數(shù),避免了細胞碎片的檢測。這種方法最近也應用在單細胞基因組學應用上,其中綠色對應了完整細胞,而紅色對應了成功分離的細胞核。這種策略讓研究人員能夠計算未裂解的殘留細胞占總細胞數(shù)的百分比,同時對細胞核進行計數(shù),提示樣本質量,幫助研究人員確定是否繼續(xù)進行單細胞基因組學流程。
全自動熒光細胞分析儀
JSY-FL-045N型熒光細胞分析儀,明場+雙色熒光通道的結合使實驗更加簡單快捷,同時還具備轉染檢測功能,更加拓寬了檢測的寬度。檢測細胞種類更加龐大,不僅適用于單純的培養(yǎng)細胞,對從組織中、骨髓中、外周血、肺泡中、肝臟中分離出的種類和來源差異較大的細胞標本,也可以快速的計數(shù)和分析。通過熒光標記技術和圖像分類識別技術對顯微獲取的熒光數(shù)字圖像自動進行分析,獲取細胞的死活狀態(tài)、凋亡情況以及實現(xiàn)細胞的分類。
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