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影響分離的因素與提高反相高效液相色譜柱柱效的途徑：
?。?）液體的黏度比氣體大一百倍，密度為氣體的一千倍左右，故降低傳質(zhì)阻力是提高柱效主要途徑。
?。?）由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。
?。?）液相色譜中，不可能通過(guò)增加柱溫來(lái)改善傳質(zhì)。
?。?）恒溫改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。
（5）流速大于0。5cm/s時(shí)，H～u曲線(xiàn)是一段斜率不大的直線(xiàn)。降低流速，柱效提高不是很大。但在實(shí)際操作中，流量仍是一個(gè)調(diào)整分離度和出峰時(shí)間的重要可選擇參數(shù)。
（6）氣相色譜中的固定液原則上都可以用于液相色譜，其選用原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中，分離柱的制備是一項(xiàng)技術(shù)要求非常高的工作，一般很少自行制備。
避免反相高效液相色譜柱過(guò)高的柱壓：
雖然色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000psi（磅/平方英寸），但過(guò)高及過(guò)大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命，避免的方法是：
（1）柱壓過(guò)高時(shí)，盡可能采用較小的流速，以不超過(guò)柱最大允許壓力的一半為宜。
?。?）當(dāng)流速較大時(shí)，應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
（3）使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí)，進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過(guò)20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí)，柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。
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