根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標準,可將儀器分為普通基因擴增儀,梯度基因擴增儀,原位PCR基因擴增儀,實時熒光定量基因擴增儀四類,下面我們就來看下他們具體的特色:
1、普通的基因擴增儀:把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),醫(yī)學(xué)臨床,檢驗檢疫等機構(gòu)。
2、梯度基因擴增儀:把一次性pcr擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其合適退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的合適退火溫度,進行有效的擴增。
3、原位基因擴增儀:用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀,如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增,不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內(nèi)的位置,于分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。
4、實時熒光定量基因擴增儀:在普通基因擴增儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),就成了PCR基因擴增儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這種基因擴增儀叫做實時熒光定量PCR儀。
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