某個(gè)實(shí)驗(yàn)間隙…

萌新：開(kāi)題報(bào)告已提交，轉(zhuǎn)眼1個(gè)月過(guò)去了，實(shí)驗(yàn)還是一頭霧水，為啥我的co-IP拉不下來(lái)蛋白？

奮斗中的師兄：我當(dāng)初正好相反，拉下來(lái)的蛋白被抗體條帶覆蓋住了，換個(gè)抗體忒不好找，無(wú)奈換了個(gè)蛋白，還好挺順利。

久經(jīng)沙場(chǎng)的大師兄：蛋白吧，不但種類(lèi)多，理化性質(zhì)差異較大，關(guān)鍵它們又喜歡組隊(duì)在細(xì)胞里干活，co-IP又是常用的手段，掌握好這個(gè)工具還是很重要的，總不能隨隨便便就換個(gè)蛋白。

 IP、co-IP、pull-down簡(jiǎn)介

IP(Immunoprecipitation)，免疫沉淀：是利用固定在磁珠或瓊脂糖樹(shù)脂等基質(zhì)上的特異性抗體對(duì)抗原進(jìn)行小型親和純化的一種方法。

 Co-IP(co-Immunoprecipitation)，免疫共沉淀： co-IP是一種常用的鑒定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本實(shí)驗(yàn)流程和IP類(lèi)似，通過(guò)使用誘餌蛋白（IP中的抗原，bait protein）特異性抗體間接捕獲與其結(jié)合的靶蛋白（prey protein）。

Pull-down：另外一種進(jìn)行蛋白-蛋白相互作用研究的方法，針對(duì)無(wú)法找到可用的抗體的靶蛋白?？梢圆捎靡粋€(gè)表位標(biāo)記標(biāo)記蛋白質(zhì)（可在細(xì)胞內(nèi)組成型表達(dá)），將其固定在基質(zhì)上獲得互作蛋白。很多蛋白質(zhì)由于無(wú)法找到可用的抗體而無(wú)法進(jìn)行免疫沉淀。

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那要怎么快速掌握這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)

輕松搞定各種疑難雜癥呢？

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