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氣泡對(duì)牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響

來源:上海谷研生物化學(xué)研究所   2017年09月14日 11:36  

在做牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗(yàn)的過程中,加樣時(shí)難免會(huì)出現(xiàn)氣泡。通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實(shí)驗(yàn)的過程中,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,那么氣泡對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)有什么影響呢?

   1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
   2.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
   3.封閉時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。
   4.加樣時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
   5.加二抗時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
   6.加顯色液時(shí)有氣泡的話---顯色不*。
   7.加終止液時(shí)有氣泡的話(1、不能*終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
   8.洗滌時(shí)有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能*洗去,做無用功。

避免方法:
   1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
   2、牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒封閉時(shí)一定要加滿孔。
   3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),氣泡會(huì)浮上來zui終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
間甲酚/3-甲酚    1ml    CDCU-1546900    聚對(duì)苯二甲suan乙二醇酯樹脂(PET...    3 Strips    CDCP-F987JS-1ml
間甲酚(標(biāo)準(zhǔn)品)    1g    CDCU-1547903    聚乙二醇硬脂suan酯 標(biāo)準(zhǔn)品    200mg    CDAB-442391
間甲酚(108-39-4)    5g    CDCU-1546853    聚乙二醇    100mg    CDCP-F987-5g
間二硝基苯    1mL    CDCT-C17834500    lv化三乙基qian 標(biāo)準(zhǔn)品    純品型,有證書,0.1g    M-8330-01
間二甲苯    5000mg/L;2x5ml    CDGG-020139-01    一溴甲烷    2000mg/L;1ml    CDGG-020193-05-10
甲醛 and 乙醛2,4-二硝基...    10ml    CDDM-C261500-50mg    頭孢匹林    50mg    CDGG-110424-01
甲萘威/呋喃丹混標(biāo) 標(biāo)準(zhǔn)品    1000mg/L于甲醇,1ml    CDGG-032199-10    殺螨酯    10mg/L;1ml    CDGG-131464-01-1ml
甲基毒死蜱    1000mg/L;1ml    CDGG-031004-01    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    1000mg/L于甲醇,1ml    CDGG-031080-02
牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒

 

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