氣泡對(duì)牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響
在做牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實(shí)驗(yàn)的過程中,加樣時(shí)難免會(huì)出現(xiàn)氣泡。通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實(shí)驗(yàn)的過程中,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,那么氣泡對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)有什么影響呢?
1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。
2.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
3.封閉時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。
4.加樣時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
5.加二抗時(shí)有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
6.加顯色液時(shí)有氣泡的話---顯色不*。
7.加終止液時(shí)有氣泡的話(1、不能*終止反應(yīng) 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
8.洗滌時(shí)有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能*洗去,做無用功。
避免方法:
1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
2、牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒封閉時(shí)一定要加滿孔。
3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),氣泡會(huì)浮上來zui終驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
間甲酚/3-甲酚 1ml CDCU-1546900 聚對(duì)苯二甲suan乙二醇酯樹脂(PET... 3 Strips CDCP-F987JS-1ml
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間二甲苯 5000mg/L;2x5ml CDGG-020139-01 一溴甲烷 2000mg/L;1ml CDGG-020193-05-10
甲醛 and 乙醛2,4-二硝基... 10ml CDDM-C261500-50mg 頭孢匹林 50mg CDGG-110424-01
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牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒
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