一、實(shí)驗(yàn)原理
生物膜的研究發(fā)展迅速，要研究生物膜的組成、結(jié)構(gòu)及功能，首先必須分離出純凈的細(xì)胞膜。
分離狀態(tài)下的哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞膜，一般稱為“血影”。哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞中沒(méi)有通常真核生物細(xì)胞內(nèi)所含有的任何細(xì)胞器，容易制備得到純粹的細(xì)胞膜，取材方面來(lái)源也十分方便，是研究細(xì)胞膜的好材料。
從哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞中分離細(xì)胞質(zhì)膜，步是收集血液并置于加有抗凝劑的容器內(nèi)，用低速離心的方法從血液中分離得紅細(xì)胞，然后用等滲緩沖液重復(fù)洗滌多次，去除血漿。第二步，將洗凈的紅細(xì)胞從等滲緩沖液轉(zhuǎn)移到低滲緩沖液中，由于滲透壓力作用于細(xì)胞質(zhì)膜，使紅細(xì)胞膨脹而溶血。后一步，將溶血的紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)充分反復(fù)洗滌，高速離心，去除血紅蛋白和其他細(xì)胞內(nèi)含物。這樣制備所獲得的終產(chǎn)品幾乎全是紅細(xì)胞膜。
二、實(shí)驗(yàn)用品
（一）器材
（1）冰凍離心機(jī)。
（2）相差顯微鏡。
（二）試劑
（1）pH7.4的等滲磷酸酸鹽緩沖液
貯液A：稱取0.780g磷酸二氫鈉溶于水，定容至1000ml。
貯液B：稱取3.582g磷酸氫二鈉溶于水，定容于2000ml。
取380ml貯液A加1620ml貯液B，用少量濃HCL調(diào)PH至7.4，再稱17.53gNACL溶于其中。
（2）PH7.4低滲Tris.HCL緩沖液：
貯液A：稱取2.42gTris，溶于水，稀釋至500ml。
貯液B：取0.84ml36%-38%HCL,稀釋至500ml。
取500ml貯液A加414ml貯液B，用水稀釋至近于2000ml，用6mol/L HCL調(diào)PH室7.4，再定容至2000ml。
（3）肝素-PH7.4等滲磷酸鹽緩沖液：將肝素溶在PH7.4等滲磷酸鹽酸緩沖液中，每ml含肝素500單位。
（三）材料
哺乳動(dòng)物的血液。
提供商 |
北京來(lái)亨科學(xué)儀器有限公司 | 下載次數(shù) |
131次 |
資料大小 |
3.1MB | 資料類型 |
JPG 圖片 |
資料圖片 |
-- | 瀏覽次數(shù) |
3288次 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
會(huì)員.png)
19
立即詢價(jià)
您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)