賽默飛液相色譜分析儀現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣,在食品分析中,無(wú)論是殘留分析還是成分分析,HPLC也已成為*的分析儀器。和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù),首先你要保養(yǎng)好它,使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài),這樣你操作它進(jìn)行分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣可以延長(zhǎng)儀器使用壽命。
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大家在學(xué)?;蚪邮軆x器公司培訓(xùn)的時(shí)候,老師會(huì)提出很多的操作注意事項(xiàng)。但要是總結(jié)歸納一下,最重要的有三點(diǎn):脫氣、過濾和沖洗。下面圍繞這三點(diǎn)進(jìn)行討論, 給新從事賽默飛液相色譜分析儀的工作者一點(diǎn)操作建議,希望能對(duì)正確的操作儀器有一點(diǎn)幫助。
1、脫氣:
流動(dòng)相脫氣對(duì)于避免HPLC系統(tǒng)出問題,順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不希望有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的力量,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當(dāng)氣泡存在時(shí),你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。
如果這個(gè)氣泡足夠大,液相泵將不能輸送任何溶劑,而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限,泵將停止工作。有些泵設(shè)計(jì)可以很好地排除氣泡,而也有一些泵設(shè)計(jì)當(dāng)氣泡存在時(shí)將停止運(yùn)轉(zhuǎn)。當(dāng)一個(gè)氣泡通過輸液泵時(shí),由于系統(tǒng)壓力大,氣泡通常會(huì)溶解在流動(dòng)相溶液中,隨流動(dòng)相通過柱子。
但是到達(dá)檢測(cè)器流通池時(shí)系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到了大氣壓,因而氣泡可能在檢測(cè)器流通池中又顯現(xiàn),在色譜圖上會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺。為解決這個(gè)問題,有些儀器公司設(shè)計(jì)一個(gè)反壓控制器,這樣可以在檢測(cè)器出口提供足夠的壓力保持氣泡始終溶解在流動(dòng)相中直到它們流出檢測(cè)器。當(dāng)然,這個(gè)壓力不能超過流通池所能承受的壓力極限,否則可能損壞檢測(cè)器。紫外/可見光(UV/VIS)檢測(cè)器的液相色譜圖中的噪音毛刺通常是氣泡進(jìn)入并通過流通池的征兆。
2、過濾:任何顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)后都會(huì)在柱子入口端被篩板擋住,最后的結(jié)果是將柱子堵塞,表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此,要采取各種預(yù)防措施,包括操作步驟和商品儀器自身的各種過濾設(shè)計(jì),努力防止或減少顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)中,從而延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命,并提高數(shù)據(jù)的可靠性。在HPLC系統(tǒng)中,顆粒物的主要來(lái)源有三個(gè)途徑:流動(dòng)相、被測(cè)樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物。
3、沖洗:使HPLC系統(tǒng)良好運(yùn)行的第三個(gè)要點(diǎn)是保持系統(tǒng)的清潔。你需要關(guān)注流動(dòng)相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對(duì)于這些地方經(jīng)常性的沖洗,將使你的系統(tǒng)保持在“Ready”狀態(tài)。
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