液相色譜儀的萌芽在國(guó)外,所以國(guó)產(chǎn)液相色譜儀的科技含量起初是遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于進(jìn)口液相色譜儀的,但是隨著我國(guó)科技技術(shù)的進(jìn)步,以及眾多液相色譜儀廠家的共同努力,為我國(guó)液相色譜儀,液相色譜儀行業(yè)貼磚加瓦,使得產(chǎn)品技術(shù)上不斷提升!
液相色譜儀歷史回顧
追溯到1960年代,由于液相色譜對(duì)高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),液相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺(tái)液相色譜儀,開啟了液相色譜儀的時(shí)代。液相色譜儀使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),以高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。
液相色譜儀現(xiàn)狀分析
如今液相色譜儀可以固定相基質(zhì)粒小,柱床極易達(dá)到均勻、致密狀態(tài),極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng)?;|(zhì)粒度小,微孔淺,樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對(duì)縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據(jù)柱效理論分析,基質(zhì)粒度小,塔板理論數(shù)N就越大。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小,會(huì)提高分辨率的道理。
液相色譜儀操作說明
液相色譜儀在使用混合溶劑作流動(dòng)相時(shí),一定要先混合,再過0.45um濾膜;等流動(dòng)相恢復(fù)至室溫,用超聲波或He氣進(jìn)行脫氣處理后,方可使用。液相色譜儀更換流動(dòng)相時(shí),必須按一定的程序進(jìn)行,否則會(huì)產(chǎn)生問題。更換流動(dòng)相有三種情況:互溶性流動(dòng)相的更換、無互溶性流動(dòng)相的更換和緩沖溶液的更換。對(duì)于*種情況,先用準(zhǔn)備更換的流動(dòng)相把吸濾器*清洗干凈,再打開儀器的排液閥,按清洗鍵,清洗泵中的流動(dòng)相。
液相色譜儀清洗解說
將吸濾器放入新流動(dòng)腥中,減慢流速清洗數(shù)分鐘后關(guān)閉排液閥。接下來清洗液相色譜儀色譜柱和檢測(cè)器檢測(cè)池直到基線平穩(wěn)。對(duì)于第二種情況,先用與新舊流動(dòng)相都互溶的中間清洗液(如:異丙醇)清洗,再用新流動(dòng)相清洗,具體過程與*種情況相同。對(duì)于第三情況,應(yīng)先用蒸餾水作為中間清洗液進(jìn)行清洗,再用新流動(dòng)相清洗即可。
液相色譜儀系統(tǒng)詳解
液相色譜儀系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中液相色譜儀的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
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關(guān)鍵詞:液相色譜儀
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