兔狂犬病毒抗體(RV-Ab)檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱: 兔狂犬病毒抗體(RV-Ab)檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號: wi105846
產(chǎn) 地: ***產(chǎn)
圖片僅供參考
使 用 目 的 :
本試劑盒用于測定兔子血清、血漿及相關液體樣本中狂犬病毒抗體(RV-Ab)表達。
實 驗 原 理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中兔子狂犬病毒抗體(RV-Ab)表達。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中狂犬病毒抗體(RV-Ab)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-抗原復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值) ,與 CUTOFF 值相比較,從而判定標本中兔子狂犬病毒抗體(RV-Ab)的存在與否。
試 劑 盒 組 成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶
6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶
8 陽性對照 0.5ml×1 瓶
9 陰性對照 0.5ml×1 瓶
10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張
12 密封袋 1 個
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操 作 步 驟
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色) 。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
注 意 事 項
1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。
保 存 條 件 及 有 效 期
1.試劑盒保存: ;2-8℃。
2.有效期:6 個月