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| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YS951C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱：SK-MEL-2+LUC人皮膚黑色素瘤細胞ATCC
細胞代次：P4
細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）
細胞凍存：無血清凍存液
細胞傳代：第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基，以便進行對比培養(yǎng)）
培養(yǎng)前的工作準備充分
包括耗材的處理、試劑的配置，無菌檢驗等等。
玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿（細胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角），然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上，之后用清水沖洗 10 遍，除去殘留酸液。瓶子之類，沖洗過程要使勁搖晃。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎，160℃ 干烤 2 h 待用。
試劑配置。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調(diào)節(jié)。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌：如抗生素、G-418 溶液、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等。有些可以采用高壓滅菌，如 PBS、D-Hank's等。
試劑分裝保存
包括營養(yǎng)液、血清等。
血清特別重要。血清必須貯存于 –20℃，如果一次無法用完一瓶，可將 40～50ml 分裝于無菌酸處理瓶中，甚至置青m素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。（一般情況下不影響細胞培養(yǎng)）
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
熱滅活是指 56℃，30 分鐘加熱已解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后，將血清放入，待溫度升高到 56℃ 后計時，一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清（包括不同批次）對細胞的影響。
注意事項：有些細胞比較特殊，如貼壁不牢，在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養(yǎng)基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
YS929CNCI-H1650[H-1650人肺支氣管癌細胞
YS930CNCI-H1975[H-1975人肺腺癌細胞
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YS932CNCI-H441[H441]人肺腺癌細胞
YS933CNCI-H508人結(jié)腸直腸腺癌細胞
YS934CNCI-H661[h661]肺癌細胞人大細胞
YS935CNCI-H716[716]人結(jié)腸癌細胞
YS936COV-90人卵巢癌細胞
YS937COVCAR-3人卵巢腺癌細胞
YS938CP53R[JHU-56]人結(jié)直腸癌細胞
YS939CPanc05.04人胰腺癌上皮細胞
YS940CPANC10.05人胰腺癌細胞
YS941CPATU8988t人胰腺癌細胞
YS942C人前列腺癌PC-3
YS943CPL45人胰腺導管腺癌細胞
YS944CProPakA.6人胚腎細胞
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YS947CRD人橫紋肌肉瘤細胞
YS948CREH白血病細胞人急性非B非T淋巴細胞
YS949CRWPE-2人前列腺正常細胞
YS950C肺癌SBC-2人小細胞
YS951C熒光標記SK-MEL-2+LUC人皮膚黑色素瘤細胞
YS952CSK-N-MC人神經(jīng)上皮瘤細胞
YS953C人腦膠質(zhì)瘤SNB-19
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YS955CSW982[SW-982人滑膜肉瘤細胞
YS956CSW579人甲狀腺癌細胞
YS957CSW620人結(jié)直腸腺癌細胞
YS958C瘤T98G人膠質(zhì)母細胞
YS959CTF-1人紅白血病細胞
YS960CTT人甲狀腺癌細胞
YS961CTU686人喉癌細胞
YS962CU20S人成骨肉瘤細胞
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