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細(xì)胞增殖方法

閱讀:1327      發(fā)布時間:2024-2-20
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細(xì)胞增殖的定義

細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。單細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì) 胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。


細(xì)胞增殖的檢測方法

1)對活細(xì)胞的代謝活性的檢測(基于MTT、CCK-8等)

2)DNA合成的檢測(基于BrdU的免疫法或EdU的點擊化學(xué)法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測 等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。

細(xì)胞代謝活性檢測

MTT(噻唑藍(lán)):通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定。活細(xì)胞能將四咪唑鹽(如MTT、XTT、WST-1)還原成藍(lán)紫色的甲瓚或甲瓚鹽(Formazan),可通過分光光度計或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測。

Cell Counting Kit–8 (CCK-8)中的WST-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng) 基中,生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比?;贑CK-8(WST-8)的試劑盒能高度準(zhǔn)確地檢測細(xì)胞增殖,比MTT法 及XTT法的靈敏度高5倍,能檢測更低的細(xì)胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。


DNA的合成的檢測

DNA的新組裝合成是細(xì)胞生長的必要條件,故經(jīng)常被用來進(jìn)行細(xì)胞增殖、細(xì)胞活力及凋亡的檢測。 BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細(xì)胞的DNA中,可通過對BrdU及EdU的檢測,從而對DNA的合 成量進(jìn)行測定。


EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲 入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì) 胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。


上海雅吉生物專業(yè)供應(yīng)各種屬細(xì)胞,原代細(xì)胞及細(xì)胞系。


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