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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CS-20004-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
產(chǎn)品簡介
詳細介紹
產(chǎn)品介紹
人T細胞活化擴增培養(yǎng)試劑盒是為在體外活化和擴增人T細胞而專門設(shè)計的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T細胞，并且達到高效擴增的目的，是研究人T細胞分化和功能的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。
產(chǎn)品特點
針對人T細胞的活化和擴增而設(shè)計
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Cat log # | 規(guī)格 | 儲存條件 |
人T細胞活化擴增培養(yǎng)試劑盒 | CS-20004-50 | 1 kit | |
人T細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | CS-20004-B | 50ml | 4℃ |
人T細胞活化補充因子 | CS-20004-ATS | 0.35ml | 4℃ |
人T細胞擴增補充因子 | CS-20004-EXS | 0.4ml | -20℃ |
預(yù)篩選T細胞專用胎牛血清 | CS-TF-5 | 5ml | -20℃ |
其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分
人T細胞磁珠分選試劑
*培養(yǎng)基配制
(在無菌生物安全柜中，開展以下操作)
1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清，混勻后使用。
注：解凍后的補充因子和血清可放置于4℃冰箱，在1個月內(nèi)使用；或者分裝至合適體積后，保存于-20℃冰箱，不可反復(fù)凍融！2.活化培養(yǎng)基配制：將1體積的活化補充因子和4體積的胎牛血清加入到35體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻，得到人T細胞活化培養(yǎng)基。如取100ul補充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推。
擴增培養(yǎng)基配制：將1體積的成熟補充因子和10體積的胎牛血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混勻，得到人T細胞擴增培養(yǎng)基。如取100ul補充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基，以此類推。
注：配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存，且于1個月內(nèi)使用完畢。使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關(guān)實驗)
1.使用磁珠分選人外周血單個核細胞中T細胞（參考所使用試劑盒的說明書），計數(shù)。
注：健康供體每1ml外周血中約含有5-10*10^5 T細胞。2.D0：使用活化培養(yǎng)基重懸T細胞，調(diào)整細胞密度至1*10^6/ml，按照如下表格所示將細胞鋪于培養(yǎng)板：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | T細胞數(shù)/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 0.2*10^6 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細胞培養(yǎng)箱，37℃，5%CO2，靜置培養(yǎng)。
4.D2：補充1/4初始培養(yǎng)體積的新鮮活化培養(yǎng)基（參考步驟2表格）。
注：*培養(yǎng)基請恢復(fù)至室溫后使用，減少對細胞的刺激。5.D3：擴孔。
1)收集細胞，離心去除活化培養(yǎng)基，使用擴增培養(yǎng)基重懸，計數(shù)；
2)調(diào)整細胞密度至5*10^5/ml，按照如下表格將細胞鋪于培養(yǎng)板，繼續(xù)擴增培養(yǎng)T細胞：
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | T細胞數(shù)/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 1*10^5 |
24孔板 | 1.0ml | 5*10^5 |
6.D5/D7：細胞計數(shù)，按照步驟5所示進行細胞擴增，或收集細胞進行后續(xù)操作和分析。
數(shù)據(jù)展示
圖：人T細胞活化擴增培養(yǎng)鑒定。分選的人CD4+T細胞按照試劑盒說明活化后第三天，顯微鏡下觀察克隆形成（A）；分選的人CD4+T和CD8+T細胞按照試劑盒說明培養(yǎng)至圖示天數(shù)，收集細胞計數(shù)計算擴增倍數(shù)（B）
