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熒光素二乙酸酯

MCE 國際站：Fluorescein Diacetate

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-D0719

CAS：596-09-8

中文名稱：二乙酸熒光素；熒光素二乙酸鹽；熒光素二乙酸酯

Synonyms：熒光素二乙酸酯; 3,6-Diacetoxyfluoran; Di-O-acetylfluorescein

純度：99.87%

存儲條件：-20°C, 避光 *溶劑中：-80°C, 6 個月; -20°C, 1 個月（避光）

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：Fluorescein diacetate 是一種細胞滲透性的酯酶底物。Fluorescein diacetate 可作為人谷胱甘肽硫轉移酶 Pi (hGSTP1-1) 的熒光底物。

生物活性：熒光素二乙酸酯是一種細胞可滲透的酯酶底物。熒光素二乙酸酯可用作 hGSTP1-1 的熒光底物。 體外熒光素二乙酸酯 (FDA) 是綠色熒光染料熒光素^[1] 的乙?；苌?。熒光素二乙酸酯 (FDA) 是一種用于活體染色的熒光探針，通過人 Pi 類谷胱甘肽 S-轉移酶 (hGSTP1) 的酯酶活性在各種胞質 GST 中選擇性地被熒光激活。在外源性過表達 hGSTP1 的 MCF7 細胞中觀察到對 GST 抑制劑敏感的熒光素二乙酸酯的熒光激活，但在過表達 hGSTA1 或 hGSTM1 的細胞中沒有觀察到。熒光素二乙酸酯可用作 hGSTP1-1 的熒光底物。為了研究熒光激活是否是由于 hGSTP1 活性，將熒光素二乙酸酯與重組 hGSTP1-1 和 GSH 在體外孵育。在存在 hGSTP1-1 和 GSH 的情況下觀察到顯著的熒光激活，而在它們中的任何一個不存在或酶被熱滅活時僅觀察到輕微的激活。這表明熒光素二乙酸酯的熒光激活取決于 hGSTP1-1 活性。從熒光增加速率與hGSTP1-1濃度的線性關系可知，該酶對1μM熒光素二乙酸酯的比活為79±15nmol/min/mg蛋白。熒光素二乙酸酯可用作熒光底物，用于在體外評估 GSTP1-1 抑制劑。以熒光素二乙酸酯為底物，Ethacrynic acid (EA) 和 NBDHEX 均以濃度依賴性方式抑制 hGSTP1-1 依賴性熒光增加，IC₅₀s 分別為 3.3±0.5 μM 和 0.61± 0.04 μM，分別為^[2]。

細胞實驗：實驗前將 MCF7 細胞（2-3×105）接種于 35 mm 玻璃底培養(yǎng)皿中。成像前，用 1 mL PBS 清洗細胞，然后在含有 1 μM 熒光素二乙酸酯（0.1% DMSO 作為助溶劑）的 1 mL Hanks' 平衡鹽溶液（不含酚紅的 HBSS(+)）中在 37°C 下孵育 5 分鐘。用 1 mL PBS 清洗細胞兩次，并在成像前加入 1 mL HBSS。在 FITC 通道（激發(fā)波長為 473 nm）和 DsRed 通道（激發(fā)波長為 559 nm）中獲取熒光素和 DsRed-Express2 的熒光圖像。對獲得的 16 位圖像進行分析[2]。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

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參考文獻：

[1]. Boyd V, et al. Limitations in the Use of Fluorescein Diacetate/Propidium Iodide (FDA/PI) and Cell PermeableNucleic Acid Stains for Viability Measurements of Isolated Islets of Langerhans. Curr Trends Biotechnol Pharm. 2008 Mar;2(2):66-84.
[2]. Fujikawa Y, et al. Fluorescein diacetate (FDA) and its analogue as substrates for Pi-class glutathione S-transferase (GSTP1) and their biological application. Talanta. 2018 Mar 1;179:845-852.