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- 艾瑞斯 品牌
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訪問次數(shù):181更新時間:2023-06-10 09:30:48
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 食品,農(nóng)業(yè) |
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【產(chǎn)品名稱】
通用名:口蹄疫A型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus A(ELISA)
【包裝規(guī)格】×2/盒96T×1/盒、96T、96T×5/盒
【預期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,F(xiàn)MDV)引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。
本試劑用于檢測牛、羊、豬血清中口蹄疫A型抗體,可用于口蹄疫A型疫苗免疫效果評價。
【原 理】
口蹄疫A型抗體檢測試劑盒由預包被口蹄疫A型抗體的酶標板、抗體工作液、抗原液、酶標記物及其他配套試劑組成,應用阻斷酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測牛、羊、豬血清樣本中口蹄疫A型抗體。實驗時將稀釋的樣本與抗原液同時加入酶標板中孵育,樣本中的抗體與酶標板上的抗體競爭抗原,阻斷抗原與板的結合;經(jīng)洗滌后,再加抗體工作液孵育;經(jīng)洗滌后加入酶標記物孵育;再經(jīng)洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加底物液,與酶標結合物反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負相關;加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫A型抗體。
【試劑盒組成】
序號名稱規(guī)格/96T×1規(guī)格/96T×2規(guī)格/96T×5
1酶標記物6ml×1(紅蓋)11ml×1(紅蓋)26ml×1(紅蓋)
2抗體工作液6ml×1(藍蓋)11ml×1(藍蓋)26ml×1(藍蓋)
3抗原液6ml×1(黑蓋)11ml×1(黑蓋)26ml×1(黑蓋)
420X濃縮洗滌液40ml×1(白蓋)40ml×2(白蓋)200ml×1(白蓋)
5底物液A6ml×1(白蓋)11ml×1(白蓋)26ml×1(白蓋)
6底物液B6ml×1(黑蓋)11ml×1(棕蓋)26ml×1(黑蓋)
7終止液6ml×1(黃蓋)11ml×1(黃蓋)26ml×1(黃蓋)
8陽性對照1.0 ml×1(紅蓋)1.5 ml×1(紅蓋)2.0 ml×1(紅蓋)
9陰性對照1.0 ml×1(綠蓋)1.5 ml×1(綠蓋)2.0 ml×1(綠蓋)
10酶標板96T×196T×296T×5
11蓋板膜125
12自封袋112
13說明書111
14稀釋板125
【儲存及有效期】 2~8℃保存,有效期12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用工作洗滌液將待檢牛、羊先按32倍稀釋(如5μl血清加入155μl工作洗滌液中,混勻),待檢豬血清按16倍稀釋(如5μl血清加入75μl洗滌液中,混勻),陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl,樣品孔每孔先加入工作洗滌液25ul,再加入稀釋后的樣品25μl;最后都加入抗原液50μl。
注:加入抗原后牛、羊樣本稀釋比例相當于1:128,豬樣本稀釋比例相當于1:64。
4.震蕩混勻10秒,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水?。┍芄夥磻?0分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加抗體工作液50μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔加酶標記物50μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
9.洗滌,同步驟5。
10.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應15分鐘。
11.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照A值≥1.0,陽性對照A值≤陰性對照A值×50%。
【檢驗結果的解釋】
1.PI(阻斷率)=(1- )×100%,PI≥50%為陽性;PI<50%為陰性。
2.本實驗檢測牛、羊血清結果為陽性時表明待檢樣本中含有口蹄疫A型抗體,且效價高于1:128,達到保護水平;反之檢測結果為陰性時表