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液相色譜法測定人血漿中齊留通
齊留通是一種在體內(nèi)和體外有效的選擇性5.脂氧合酶抑制劑，臨床應(yīng)用為其外消旋體。由美國公司研制開發(fā)，1997年3月在美國上市。齊留通可以直接抑制5.脂氧合酶的活性，減少白三烯的合成，從而減輕支氣管內(nèi)炎癥，降低氣道反應(yīng)性，達(dá)到控制哮喘發(fā)作的治療目的。
為研究齊留通在中國健康志愿者體內(nèi)的藥物動力學(xué)，需要建立靈敏可靠的生物樣品的分析方法。國外有文獻(xiàn)采用HPLC-UV法測定生物樣品齊留通濃度，其定量限均可達(dá)到0.01mg/L，但血漿樣品的處理采用固相萃取。
血漿樣品經(jīng)液液萃取的齊留通HPLC-UV血藥濃度測定法，定量限為0.0781mg/L。該法準(zhǔn)確+靈敏且回收率高，可用于齊留通臨床血藥濃度的監(jiān)測、藥物動力學(xué)和生物利用度研究。
檢測儀器：液相色譜儀，工作站，臺式高速離心機，微量旋渦混合儀。
色譜條件：流動相：磷酸二氫鈉（20mmol/L，pH4.0左右）-乙腈-四氫呋喃（75:25:5）流速1.5ml/min；柱溫35℃；檢測波長260nm。
測定方法：精密稱取齊留通和乙酰苯胺適量，以甲醇分別配成1000mg/L"齊留通的對照儲備液和64mg/L的內(nèi)標(biāo)儲備液。用蒸餾水稀釋儲備液得到相應(yīng)濃度的工作溶液，置0℃冰箱保存待用。
取血漿樣品0.5mL，加入乙酰苯胺溶液（64mg/L）50µL，混勻。加入二氯甲烷-無水乙醇（9:1）6mL，旋渦混勻2min，2500r/min離心5min，取下清液，置35℃水浴中氮氣吹干。殘渣用甲醇-水（1:1）100µL溶解，進(jìn)樣20µL，記錄色譜圖及峰面積。以齊留通的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值定量。