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怎么樣選擇好的液相色譜儀柱
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一、硅膠基質(zhì)填料(液相色譜儀柱)
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(ZH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性教強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)落的組份zui先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform) 二氯甲烷(Methylence Chloride)等.
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)教弱的官能團(tuán)的鍵合相。
反相色譜所使用的流動(dòng)相極性教強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性教強(qiáng)組合zui先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。
常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料(液相色譜儀柱)
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PG值為1-14均可使用。
相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的淑水性;大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。
現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效教低。
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