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檢測植物組織中多胺含量的液相色譜法
檢測植物組織中多胺含量的液相色譜法
多胺是植物體內(nèi)具有生理活性的一類有機(jī)分子物質(zhì),主要有腐胺、尸胺、亞精胺與精胺等。它們與植物的生長發(fā)育關(guān)系密切,參與植物細(xì)胞分裂、DNA凝聚及急速的調(diào)控等。它們與植物的生長發(fā)育關(guān)系密切,參與植物細(xì)胞分裂、DNA凝聚及激素的調(diào)控等。在環(huán)境脅迫下,植物體內(nèi)積累大量的多胺類物質(zhì),對穩(wěn)定細(xì)胞膜、核酸及蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的構(gòu)象有重要的作用。多胺在人體內(nèi)也大量存在,并與人類健康息息相關(guān)。食物是人體內(nèi)多胺的重要來源之一。因此如何準(zhǔn)確而快速地檢測植物組織中的多胺技術(shù)越來越受到人們的重視。
多胺屬脂肪族直鏈胺類,以前主要用氨基酸分析和紙電泳等方法測定,這兩種檢測方法樣品回收率低,檢測靈敏度也不高。目前多用衍生化的方法,即將多胺的一、二級氨基接在對熒光或紫外吸收的基團(tuán)上,再通過薄層或液相色譜分離檢測。常用的衍生試劑有丹磺酰氯、苯甲酰氯、苯磺酰氯及熒光胺類等。
自從1979年Redmond和Tseng采用苯甲酰化的方法一來,色譜工作者對此進(jìn)行了不斷地改進(jìn),已近成為較為成熟的檢測植物體內(nèi)多胺的方法。然而在許多細(xì)節(jié)方面,如反應(yīng)的時間、副反應(yīng)的干擾、樣品的保存及分離條件的進(jìn)一步優(yōu)化等還有很多工作要做。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實(shí)行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
質(zhì)譜條件:
流動相 | 甲醇-水(體積比60:40) |
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柱溫 | 30℃ |
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檢測波長 | 230nm |
流動相流速 | 0.7ml/min-1 |
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測定結(jié)果: