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頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜分析藍(lán)莓粗提物中的揮發(fā)性成分
藍(lán)莓為杜鵑花科越桔屬多年生落葉或常綠灌木,果實(shí)呈藍(lán)色,外披一層白色果粉,其果肉細(xì)膩,酸甜可口,營(yíng)養(yǎng)豐富,具有*的香氣。研究表明,藍(lán)莓中含有花青苷(花青素、酚配基與糖的結(jié)合體)、綠原酸、黃酮素、亞麻油酸、碟二苯乙烯(紫檀芪)等生物活性成分,其藥用,經(jīng)濟(jì)價(jià)值遠(yuǎn)高于其他各類(lèi)水果。目前,對(duì)于藍(lán)莓天然活性物質(zhì)的研究主要集中在花青素等酚酸類(lèi)物質(zhì)及揮發(fā)性香氣成分方面。已有研究報(bào)道,采用靜態(tài)頂空和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),分別從高叢越桔果實(shí)的香氣成分中檢測(cè)出了67種和39種揮發(fā)性成分,但未對(duì)藍(lán)莓醇提取物中的揮發(fā)性物質(zhì)具有生物活性功能,如唇形科植物羅勒能散發(fā)出強(qiáng)烈氣味,在非洲被廣泛用于驅(qū)趕蚊蠅,且從羅勒提煉出來(lái)的原油可用于消滅昆蟲(chóng)。蒔蘿、大蒜的揮發(fā)物在特定的條件下可抑制微生物的生長(zhǎng)。樟腦、長(zhǎng)葉薄荷酮等還會(huì)對(duì)其他植物的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用。因此,對(duì)于植物提取中揮發(fā)性天然產(chǎn)物的研究已經(jīng)逐漸成為上的研究熱點(diǎn)。
目前,對(duì)藍(lán)莓粗提物中化學(xué)組分的研究主要通過(guò)HPLC。電子吸收光光譜法、質(zhì)譜及核磁共振等方法。有研究報(bào)道,已從杜克藍(lán)莓果實(shí)中鑒定出32種揮發(fā)油成分而對(duì)藍(lán)莓粗提物中揮發(fā)性物質(zhì)的相關(guān)研究在國(guó)內(nèi)還鮮有報(bào)道。頂空固相微萃取是一種簡(jiǎn)單快速的提取技術(shù),已被用于蔬菜、水果、中藥和酒類(lèi)等樣品中揮發(fā)性成分的提取。此法樣品消耗量少、測(cè)定結(jié)果可靠、方法便捷、不需溶劑且能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作,因此常被用于藥物揮發(fā)性成分的定性分析。本研究通過(guò)醇提法提取中國(guó)栽培藍(lán)莓品種中的化學(xué)物質(zhì),采用頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜法(HS-SPME-GC-MS)分析藍(lán)莓粗提物中的揮發(fā)性成分,并利用面積歸一化法定量其組分含量,以期為藍(lán)莓粗提物中各單一成分生物功能的研究藍(lán)莓資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供重要的參考依據(jù)。
樣品處理:
準(zhǔn)確稱(chēng)取藍(lán)莓果凍20.0g,用微波爐快速解凍,導(dǎo)入組織勻漿機(jī)中粉碎3min,加入75%乙醇200ml,用超聲波清洗機(jī)30℃提取25min,用4000r/min室溫離心30min,布氏漏斗過(guò)濾,收集濾液,45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)40min至*蒸干,加入20ml蒸餾水。濃度為1g/ml,存放于4℃冰箱備用
色譜條件:
進(jìn)樣器溫度 | 250℃ |
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程序升溫 | 起始溫度50℃,保持2min;以10℃/min的速度升至140℃,保持2min,再以5℃/min的速度升至230℃,保持5min;隨后以8℃/min的速度升至230℃,保持5min;隨后以8℃/min的速度升至230℃,保持2min;zui后以15℃/min的速度升至250℃,保持1min |
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載氣 | 高純度氦氣,不分流 |
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譜圖分析: