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固相萃取-液相色譜法檢測(cè)飼料中喹乙醇的添加量
喹乙醇又稱喹酰胺醇,商品名為倍育諾、快育靈,抗菌促進(jìn)生長(zhǎng)劑,具有促進(jìn)蛋白同化作用,提高飼料轉(zhuǎn)化率,使豬增重加快。對(duì)革蘭氏陰性菌有抑制作用;對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有一定的抑制作用;對(duì)四環(huán)素、氯霉素等耐藥菌株仍然有效。由于喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性,對(duì)大多數(shù)動(dòng)物有明顯的致畸作用,甚至使動(dòng)物中毒死亡,對(duì)人也有潛在的三致性,即致畸形,致突變,致癌。在美國(guó)和歐盟喹乙醇都被禁止用作飼料添加劑?!吨袊?guó)獸藥典》(2005版)也有明確規(guī)定,喹乙醇被禁止用于家禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖。
利用固相萃取法可以降低試樣提取液中雜質(zhì)的含量,本實(shí)驗(yàn)選用中性氧化鋁凈化試樣提取液。不僅節(jié)約了實(shí)驗(yàn)成本,還減少了有機(jī)溶劑的使用,使實(shí)驗(yàn)環(huán)境更加安全健康。
儀器介紹
LC600B等度液相色譜儀(南京科捷分析儀器有限公司)檢測(cè)器采用24位AD轉(zhuǎn)換器,支持開機(jī)進(jìn)行自檢,查看氘燈狀態(tài),設(shè)定氘燈狀態(tài)。具有技術(shù)的緩沖器使輸液泵獲得*的流量、壓力穩(wěn)定性、極小的死體積。采用雙柱塞往復(fù)泵,串聯(lián)泵,一個(gè)為主吸附柱塞,一個(gè)為輔助柱塞,達(dá)到流量的穩(wěn)定。選用7725i美國(guó)進(jìn)口六通閥,手動(dòng)進(jìn)樣。自動(dòng)數(shù)據(jù)分析功能保證整個(gè)樣品分析,智能反控軟件可做到一鍵操作。廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
實(shí)驗(yàn)方法
樣品處理:
1.提取 準(zhǔn)確稱取5g左右精研磨的動(dòng)物飼料粉末置于250mL具塞錐形瓶?jī)?nèi),加入50mL 70%甲醇溶液振蕩提取30min,取上清液于10000rpm離心10min,得到提取液;
2.凈化 制備中性氧化鋁柱:長(zhǎng)30cm的玻璃層析柱,內(nèi)徑10mm,下端放入一小團(tuán)玻璃纖維,上面填充4g中性氧化鋁。向柱中加入20mL流出液,收集隨后的流出液,過0.45μm濾膜收集濾液,作為待測(cè)液。
分析條件:
色譜柱 C18柱250mm×4.6mm,5μm
檢測(cè)器 紫外檢測(cè)器
流動(dòng)相 15%甲醇水溶液(乙酸調(diào)PH=3.0)
流速 1.0mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng) 370nm
進(jìn)樣量 20μL