一種逆轉(zhuǎn)錄酶，旨在提供驚人的結(jié)果
您將如何構(gòu)建理想的逆轉(zhuǎn)錄酶？它必須以高產(chǎn)率制造非常長(zhǎng)的 cDNA。它必須能夠使

用非常少量的輸入 RNA。當(dāng)然，它必須快速運(yùn)行。FastGene Scriptase II 會(huì)檢查

所有三個(gè)框，而且價(jià)格合理。就是這樣。先，將突變插入天然 MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶的

 RNase H 結(jié)構(gòu)域，從而提供更高產(chǎn)量的全長(zhǎng) cDNA。接下來，進(jìn)行改變以增加酶的

天然熱穩(wěn)定性，從而提供更強(qiáng)大的酶，即使在高溫下也不會(huì)失去加工能力。后，

反應(yīng)緩沖液的組成經(jīng)過優(yōu)化，可從極低水平的輸入 RNA 高速生產(chǎn) cDNA。

這種尺寸、速度、和生產(chǎn)使 FastGene Scriptase II 成為需要 cDNA 的復(fù)

雜應(yīng)用的*，例如 RT-qPCR 和 NGS。這里有一些客戶反饋！

應(yīng)用

• 基因表達(dá)的量化

• 逆轉(zhuǎn)錄定量PCR

• 下一代測(cè)序

• 低 RNA 濃度

• 困難的模板

在更短的時(shí)間內(nèi)獲得更長(zhǎng)的 cDNA
FastGene Scriptase II 具有修飾的 RNase H 結(jié)構(gòu)域，可減少模板 RNA 的活性

裂解。通過減緩這種降解，RT 酶允許模板保持完整的時(shí)間足以提供更長(zhǎng)的 cDNA。

通常達(dá)到 12 kBp 的 cDNA 大小。這種工程酶的質(zhì)量非常出色，典型的 50 分鐘孵

育時(shí)間可以縮短到 5 分鐘。

ReadyMix 格式讓它變得如此簡(jiǎn)單！
FastGene Scriptase II 提供三種方便的格式。您可以購買帶有基本必需品的 S

criptase II 逆轉(zhuǎn)錄酶：5x RT 緩沖液、dNTP、DTT 和一些無 RNAse 的水 (LS53)。您可以購買完整的 cDNA 合成 (LS63)，其中包含 LS53 格式的所有內(nèi)容以及為您的特定應(yīng)用優(yōu)化優(yōu)質(zhì)cDNA 合成混合物所需的所有其他內(nèi)容：隨機(jī)

六聚體引物、寡 dT 引物和 RNase 抑制劑。后一個(gè)選項(xiàng)是 ReadyMix 格式

（LS64 和 LS65），適用于需要快速獲得結(jié)果且無需優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)室。

期待多重 PCR、qPCR 和 NGS
的出色結(jié)果 FastGene Scriptase II 為常見的下游應(yīng)用（如 PCR、qPCR 和 NGS）提

供了cDNA 模板。得到的全長(zhǎng) cDNA 質(zhì)量非常高，可提供基因和任何修飾

（如剪接變體）的完整圖像。使用 Scriptase II 的結(jié)果與十分流行的逆轉(zhuǎn)錄酶品牌相比非常有利。例如，使用來自 Scriptase II 的 cDNA 進(jìn)行的復(fù)雜多重 PCR 反應(yīng)在品牌之間是無法區(qū)分的。在下面的這些示例中，GAPDH 和 YWHAZ 通過 qPCR 進(jìn)行了仔細(xì)檢查，并且在廣泛的輸入 RNA 濃度范圍內(nèi)都顯示出幾乎相同的 Ct 值。

使用 GAPDH 引物和 cDNA 的 qPCR 結(jié)果比較，這些引物是由競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手 I 的 SS-II 酶和 FastGene Scriptase II 在 42 °C 下使用不同的 RNA 起始濃度產(chǎn)生的。

比較使用 YWHAZ 引物和 cDNA 的 qPCR 結(jié)果，這些引物是通過競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手 I 的 SS-II 酶和 FastGene Scriptase II 在 42 °C 下使用不同的 RNA 起始濃度產(chǎn)生的。

不同 PCR 結(jié)果的比較 —多重PCR
比較使用競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手 I 的 SS-II 酶和 FastGene Scriptase II 在 42 °C 和 50 °C 下

產(chǎn)生的 cDNA 的多重 PCR。