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基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株技術(shù)背景
研究某個基因的功能常用的手段是在宿主細胞中過表達(over expression)或者通過RNAi 敲減(knock-down)該基因?;蜻^表達是指通過在細胞內(nèi)提高特定基因的表達水平,從而實現(xiàn)基因的功能增強(gain of function)。基因過表達作為一種傳統(tǒng)的分子生物學技術(shù)至今依然在生物學研究中發(fā)揮著重要作用,常規(guī)手段有瞬時轉(zhuǎn)染和篩選穩(wěn)定細胞株。
篩選出該基因的過表達穩(wěn)定細胞株會給您后續(xù)實驗帶來極大的便利,讓實驗結(jié)果具有高度的可重復性。有了穩(wěn)定細胞株,后期的Co-IP、Pull-Down、亞細胞定位、表型分析等實驗都會變得非常便利。
慢病毒幾乎可以感染所有種類的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩(wěn)定表達。構(gòu)建穩(wěn)定細胞株的基本原理就是利用慢病毒的特性,將外源DNA克隆到具有某種抗性的慢病毒載體中,通過包裝慢病毒并感染目的細胞,慢病毒載體被轉(zhuǎn)染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選,就可以得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,適合在各類細胞中穩(wěn)定過量表達不同大小的外源基因。
立譜沃生物“基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株"技術(shù)服務介紹
立譜沃生物建立了一套成熟穩(wěn)定的慢病毒包裝體系,針對多種不同細胞類型(包括難轉(zhuǎn)染細胞),建立了標準的轉(zhuǎn)基因技術(shù)服務體系,為您提供基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建服務。您只需提供目的基因和需要構(gòu)建的細胞系,我們將按照您的要求完成目的基因過表達細胞株的構(gòu)建和檢測,為您提供高質(zhì)量的基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株。
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