產(chǎn)品貨號：R21807

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡介：

  尚寶生物生產(chǎn)的Hoechst33342/PI細胞凋亡染色試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細 胞凋亡與細胞壞死檢測方法。本試劑盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方 法。細胞發(fā)生凋亡時，染色質(zhì)會固縮。Hoechst33342 可以穿透細胞膜，染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞 明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜，對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于 壞死細胞，其細胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細 胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光， 壞死細胞為強紅色熒光＋強藍色熒光。參考下圖，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細胞，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細 胞。

染色快速方便，兩種染料的染色僅需 20-30 分鐘，一步染色即可完成。使用方便，使用流式細胞儀檢測 時，無需稀釋等配制過程，也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測 100 個樣品，每個樣品的細胞 數(shù)量可以為 1×10 5-1×10 6。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 每個樣品收集約 10-100 萬細胞于 1.5ml 離心管內(nèi)，離心棄上清。細胞沉淀用 0.8-1ml 細胞染色緩沖液 重懸。

2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。

3. 加入 5 微升 PI 染色液。

4. 混勻，冰浴或 4℃孵育 20-30 分鐘。

5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測，檢測前離心沉淀細胞，用 PBS 洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。 對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測，可以不收集細胞，直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分鐘。染色后 PBS 洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項：

1. 需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。

2. 染色后宜盡快檢測。

3. Hoechst 33342 對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性，請注意適當(dāng)防護。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件：

4℃保存六個月有效，-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存