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細(xì)胞系的抗體滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關(guān)，實(shí)踐證明提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系和CHO細(xì)胞系的表達(dá)滴度可以提高抗體產(chǎn)量，有效降低生產(chǎn)成本。  

穩(wěn)定細(xì)胞系中的細(xì)胞表達(dá)滴度  

穩(wěn)定生產(chǎn)細(xì)胞系生產(chǎn)過程中，在可重復(fù)性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢。細(xì)胞的培養(yǎng)參數(shù)對細(xì)胞系的培育也具有較大的影響力。比如：溫度、pH、滲透壓、氣體流速、罐內(nèi)壓力、攪拌罐內(nèi)的攪拌槳類型、攪拌速度和細(xì)胞代謝物水平等。另外，在生物工藝技術(shù)中，細(xì)胞的密度、細(xì)胞活性、線粒體活性、LDH、NADH水平等生物因素，也會影響到蛋白質(zhì)合成、PTM等從而波及到產(chǎn)物的產(chǎn)量及品質(zhì)。  

所以，優(yōu)化細(xì)胞系的抗體滴度，除了對宿主細(xì)胞系進(jìn)行設(shè)計(jì)改造外，細(xì)胞的培養(yǎng)參數(shù)優(yōu)化設(shè)計(jì)，對于提升細(xì)胞表達(dá)滴度、滿足產(chǎn)品質(zhì)量要求也很重要。  

我們知道，在抗體產(chǎn)品的產(chǎn)量是通過工藝放大來實(shí)現(xiàn)，而生物工藝放大過程中又會受到很多因素的影響。比如生物因素和細(xì)胞培養(yǎng)參數(shù)等，生物反應(yīng)器容量體積等。所以在放大工藝生產(chǎn)中的各個(gè)環(huán)節(jié)，都需要嚴(yán)格把控，此外還需要進(jìn)一步強(qiáng)化技術(shù)培訓(xùn)指導(dǎo)，是工藝生產(chǎn)操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，從而確保細(xì)胞的生產(chǎn)力與產(chǎn)品質(zhì)量的有效提升。  

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中的細(xì)胞表達(dá)滴度  

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞由于此類細(xì)胞構(gòu)建生產(chǎn)細(xì)胞系比較耗時(shí)，而且難度也較大，故很少用于臨床或者商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)，比較適用于實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模試驗(yàn)。在穩(wěn)定生產(chǎn)細(xì)胞系進(jìn)行規(guī)?；に嚪糯笊a(chǎn)時(shí)，有時(shí)也會使用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞放大到批次或補(bǔ)料分批生物反應(yīng)器工藝中，以快速提升產(chǎn)品產(chǎn)量加速生產(chǎn)過程。目前，一些細(xì)胞生產(chǎn)廠商也在嘗試提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的表達(dá)滴度。比如：這種工藝技術(shù)用于蛋白質(zhì)生產(chǎn)的轉(zhuǎn)染工藝和哺乳動物表達(dá)載體進(jìn)行優(yōu)化，可使重組抗體的單位體積產(chǎn)量達(dá)到>0.5g/L。國內(nèi)細(xì)胞生產(chǎn)商開發(fā)的CHO細(xì)胞高滴度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)具有高產(chǎn)量低成本等優(yōu)勢，已成為生產(chǎn)抗體類藥物廣泛應(yīng)用的工程細(xì)胞，而CHO細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是新藥研發(fā)過程中不可少的技術(shù)工藝。  

從長遠(yuǎn)看來，提高瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞的抗體滴度在基因治療領(lǐng)域也很有意義。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是雖是產(chǎn)生高質(zhì)量載體的常用方法，但規(guī)?；糯笊a(chǎn)仍然是基因制藥行業(yè)的一個(gè)重大挑戰(zhàn)。要想取得重大突破還需要更多的努力。在進(jìn)行MDCK細(xì)胞、HEK293細(xì)胞培養(yǎng),CHO懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、高抗體滴度瞬轉(zhuǎn)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)時(shí)也會面臨同樣的問題。