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操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9）在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照進(jìn)行，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解；
補(bǔ)體的控制方法：
①用EDTA稀釋標(biāo)本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長(zhǎng)或凝固不全等；
控制方法：采血時(shí)規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管，經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存；保存時(shí)間不宜過久，檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本；對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

吉非羅齊1Oβ葡萄糖苷英文名(EN)：Tributylphosphineoxide,規(guī)格(SP)：5G

吉非羅齊1Oβ葡萄糖苷d6英文名(EN)：1Naphthylisothiocyanate,規(guī)格(SP)：1G

吉非替尼英文名(EN)：Chlorodiphenylphosphine,98%規(guī)格(SP)：5G

吉非替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名(EN)：Methylmethoxyacetate,規(guī)格(SP)：25G

吉拉德試P(>95.0%(T))英文名(EN)：Diphenylphosphinicchloride,98%規(guī)格(SP)：10G

吉拉爾特試T英文名(EN)：2(Ditertbutylphosphino)biphenyl,規(guī)格(SP)：1G

吉馬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名(EN)：N(Diphenylmethylene)glycinetertbuty...規(guī)格(SP)：1G

吉莫斯特;吉美嘧英文名(EN)：PyBOP,98%規(guī)格(SP)：5G

吉莫斯特;吉美嘧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名(EN)：Triphenylphosphineoxide,98%規(guī)格(SP)：25G

吉氏色素,姬姆氏色素英文名(EN)：Triphenylphosphine,規(guī)格(SP)：100G

吉他素,柱晶白素英文名(EN)：Beryllium,99.9%規(guī)格(SP)：5G

吉它素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名(EN)：2Aminoethyldiphenylborinate,≥97.0%規(guī)格(SP)：1G

吉托皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名(EN)：Diphenylcarbonate,規(guī)格(SP)：100G

吉西他濱英文名(EN)：Berylliumoxide,99.98%規(guī)格(SP)：1G

二(>98%，BR)英文名(EN)：Ethylthioglycolate,規(guī)格(SP)：10G

二(StandardforGC,≥99.5%(GC))英文名(EN)：Methylthioglycolate,≥97.0%規(guī)格(SP)：100ML

二二(>99.0%(GC))英文名(EN)：Methyldichloroacetate規(guī)格(SP)：100ML

二二(>99.0%(GC))英文名(EN)：Methylpalmitate,≥規(guī)格(SP)：5G
VCAM-1ElisaKitSolvent Red 24蘇丹Ⅳ85836

2TRIFLUOROMETHYL2PROPANOL2三2507528

NBenzylacetoacetamide酰酰芐882360

PYRIDINE3SULFONYL CHLORIDE3酰42899763

2,5Dihydroxy1,4dioxane2,5dimetha,3二羥二聚體62147493

NalphaFmocLlysine hydrochlorideFmocL賴氨139262230

NAcetylneuraminic acid methyl esterN酰神經(jīng)氨50998135

STEARYLDIETHANOLAMINE硬脂二10213782

Bromfenac sodium溴芬91714931

2Mercapto1,3,4thiadiazol2巰1,3,4噻二唑18686823

ZDGLU(OTBU)OHZD叔谷氨51644838

Octadecyl isocyanate異十八112969

Trimethoxyoctylsilane三硅3069407

Europium(III) acetate hydrate醋銪62667645

PULCHINENOSIDE B4白頭翁皂甙 B4129741577

輔酶Q10 303980 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

京平 6902778 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

山茱萸新苷 131189576 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

參二 19666763 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

異茜草素1 7460437 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 5mg

表沒食子兒茶素 970741 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

秋水仙 64868 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

桑皮苷A 102841429 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

香葉木素 520343 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

百合對(duì)照藥材  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 1g

九香對(duì)照藥材  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 1g

芒柄花苷 486624 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

異綠原C 32451880 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

反式茴香腦  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 0.2ml

去姜黃素 22608113 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。