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操作步驟:

1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；
補體的控制方法：
①用EDTA稀釋標本；
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；
2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；
控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。

雷米普利(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98,標準品RamiprilONPG發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口

基酞規(guī)格：HPLC≥98%;20mg訂購|咨詢ELISAKitforHumanProteinFAM214A小鼠糖原化酶B(PYGB)ELISA試盒，英文名：PYGBELISAKit

滿山紅(興安杜鵑)FoliumRhododendriDaurici (XinganDuJuan)保存：-20℃規(guī)格：5g富含脯氨突觸相關蛋白SHANK3抗體

連翹酯苷E訂購|咨詢規(guī)格：HPLC≥98%;20mg核輸出蛋白5抗體CES1ELISAKit羧酯酶1(CES1)ELISA試盒

二鈉一水(ACS級)質(zhì)量規(guī)格：ACS級,>98.5%Sodiumphosphate,monobasic,monohydrate3%NaC1糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口

環(huán)沙星雜質(zhì)ICiprofloxacin impurityI保存：-20℃規(guī)格：50mg基質(zhì)金屬蛋白酶20

L-絲氨質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Serine鼠李糖桿菌LactobacillusrhamnosusCaSki,人宮頸細胞

高烏素規(guī)格：HPLC≥98%;20mg訂購|咨詢ELISAKitforHumanSerpinA11大鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)ELISA試盒，英文名：TNNI3ELISAKit

外消旋噻嗎洛爾-d5馬來鹽質(zhì)量規(guī)格：國進口racTimolol-d5MaleateUMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

羥基基纖維素(30000mpa.s)質(zhì)量規(guī)格：30000mpa.s,BRHPMC,hydroxypropylmethylcelluloseNCI-H2087(人非小細胞肺腺細胞)鏈霉菌Streptomycessp.

富馬;Fumaricacid規(guī)格：20mg訂購|咨詢SKOV3[SK-OV-3],人卵巢腺細胞系

奧司明訂購|咨詢規(guī)格：100mg化雄激素受體抗體Thymosinβ4ELISAKit胸腺肽β4(Thymosinβ4)ELISA試盒

老鶴草訂購|咨詢規(guī)格：2g花生四（Arachidonicacid）ELISA試盒通用96T0.78-50ng/mL小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試盒，英文名：TGFβ2ELISAKit

C12E810%溶液質(zhì)量規(guī)格：BRC12E8大鼠正常腎成纖維細胞NRK-49F
CK elisa試劑盒Phospho-TSC2 (Thr1462)RICTOR延伸突觸蛋白1抗體

Phospho-Tuberin (Thr927)RelB紅細胞膜蛋白4.2抗體

phospho-Tau protein(Ser396)Rad17轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體

TNK1Phospho-Rad17 (Ser645)內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體

CDHF14C1orf149人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試盒

CLCA3CARKD人膠原交聯(lián)(PYD)免疫試盒

CD200RCDX1人降脂素(Adipsin)免疫試盒

CELA1C1QTNF8人降鈣素原(PCT)免疫試盒

c-KitC21ORF62人降鈣素基因相關肽(CGRP)免疫試盒

CD99L2phospho-CPLA2 (Ser505)人降鈣素(CT)免疫試盒

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴 
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌 
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板 
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。