詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Histoplasm spp.PCR
貨號:YS30889-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Recombinant human NGF protein (Active)原裝、分裝苯磺索拉非尼(標(biāo)準(zhǔn)品)
SDF1 antibody原裝、分裝鏈脲佐菌素(STZ)
Recombinant human SDF1 protein (Active)原裝、分裝鏈脲佐菌素(STZ)
Recombinant human SDF1 protein (Active)原裝、分裝鏈脲佐菌素(STZ)
SDF1 antibody原裝、分裝鏈脲佐菌素(STZ)
Recombinant human SDF1 beta protein原裝、分裝鏈脲佐菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)
Recombinant human SDF1 beta protein原裝、分裝康唑
Interferon gamma antibody [GIF-3]原裝、分裝康唑
CXCL5 antibody原裝、分裝康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Biotin antibody原裝、分裝胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素
Cytomegalovirus IE1 and IE2 antibody [CH160]原裝、分裝UDPGA Na;尿苷-5'-二葡糖三鈉鹽
Hsp70 antibody [BB70]原裝、分裝替卡西林,替卡西林二鈉
Hsp90 beta antibody [H90-10]原裝、分裝替卡西林,替卡西林二鈉
Lipocalin-2 / NGAL antibody [ABS 039-08]原裝、分裝替卡西林,替卡西林二鈉
Recombinant Human IL-10 protein原裝、分裝替卡西林(標(biāo)準(zhǔn)品)
Recombinant Human IL-12 p35 protein原裝、分裝RGD肽
Recombinant Human IL-13 protein原裝、分裝RGD肽
Recombinant Human IL-15 protein原裝、分裝RGD肽
組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒LIFR antibody [MM0455-9B23]原裝、分裝4,4'-二基-2,2'-聯(lián)吡啶(>98.0%(GC)(T))
LIX1 antibody原裝、分裝2,4-聯(lián)吡啶(>97.0%(GC))
TBC1D21 antibody原裝、分裝2,4-聯(lián)吡啶(>97.0%(GC))
Thrombospondin 2 antibody [MM0568-9T19]原裝、分裝2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二羧(>95.0%(HPLC)(T))
NKG2D antibody [MM0489-10R27]原裝、分裝2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二羧(>95.0%(HPLC)(T))
Recombinant Human RGS1 protein原裝、分裝5 5'-二基-2,2'-聯(lián)吡啶(>98.0%(GC)(T))
Recombinant Human GAB1 protein原裝、分裝5 5'-二基-2,2'-聯(lián)吡啶(>98.0%(GC)(T))
Recombinant Human RAC3 protein原裝、分裝5 5'-二基-2,2'-聯(lián)吡啶(>98.0%(GC)(T))
RECQ1 antibody原裝、分裝2,2'-聯(lián)嘧啶(>95.0%(GC))