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大容量低速冷凍離心機(jī)的實(shí)際運(yùn)用分享

閱讀:1587      發(fā)布時(shí)間:2021-9-15
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  大容量低速冷凍離心機(jī)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、安裝方便、操作容易,能保持產(chǎn)品的晶粒形狀,采用彈性支撐結(jié)構(gòu),能減少由于不均勻負(fù)載引起的振動(dòng),其運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)。能實(shí)現(xiàn)密封,避免對(duì)物料的污染。
  下面咱們來(lái)了解下采用大容量低速冷凍離心機(jī)提染色體DNA,可直接應(yīng)用于常規(guī)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),包括PCR、限制性內(nèi)切酶的切割,以及基因組文庫(kù)的構(gòu)建的實(shí)際應(yīng)用:
  1、取1ml過夜培養(yǎng)菌液于8000g,離心機(jī)離心2min。去除培養(yǎng)基后,用400ulSTE緩沖液(100mMNaCl,10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)重懸菌體,按相同條件離心清洗菌體兩次。
  2、收集的菌體用200ulTE緩沖液(10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)懸起后加約50mg直徑425-600um規(guī)格的玻璃珠,再加入100ulTirs飽和苯酚。
  3、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩(細(xì)菌,振蕩60s;酵母,振蕩120s-200s),隨后于4℃,13000g,離心5min。
  4、吸取上層水相(約160ul)轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的離心管中,加TE緩沖液補(bǔ)至200ul,再加入100ul氯仿混勻后,于4℃,13000g,離心5min。重復(fù)此步兩到三次。
  5、轉(zhuǎn)移上層水相(約160ul)至一個(gè)新的離心管中,補(bǔ)加40ulTE和5ulRNase(10mg/ml),37℃消化10min。
  6、加入100ul氯仿混勻于4℃,13000g,離心5min。
  7、轉(zhuǎn)移上層水相(約150ul)至一個(gè)新的離心管中。
  8、至此,上層水相即含有純化好的基因組DNA,可直接用于隨后的常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
  希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。

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