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卻普曼瓊脂培養(yǎng)基原理及現(xiàn)象
閱讀:18 發(fā)布時間:2025-2-14一、用途及原理
該培養(yǎng)基用于金黃色葡萄球菌的檢測。
蛋白胨、酵母浸粉提供細(xì)菌生長所需的基本營養(yǎng),磷酸氫二鉀為緩沖劑,甘露醇為可發(fā)酵碳源,較高濃度的氯化鈉可抑制不耐鹽細(xì)菌的生長,高濃度的硫酸銨可使明膠發(fā)生沉淀析出,培養(yǎng)基呈不透明狀。金黃色葡萄球菌可耐高滲環(huán)境,能在此培養(yǎng)基中生長,將不溶性大分子的明膠分解為小分子可溶性的氨基酸,菌落周圍的培養(yǎng)基變?yōu)橥该鳡?。金黃色葡萄球菌還可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,培養(yǎng)結(jié)束后,滴加酸堿指示劑可觀察產(chǎn)酸現(xiàn)象。
二、培養(yǎng)基配方(g/L)
蛋白胨 | 10.0 |
酵母浸出粉 | 2.5 |
磷酸氫二鉀 | 5.0 |
明膠 | 30.0 |
甘露醇 | 10.0 |
氯化鈉 | 55.0 |
硫酸銨 | 75.0 |
瓊脂 | 15.0 |
pH | 7.2±0.2 |
三、配制方法
稱取本品202.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,冷卻至45-50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。
注:培養(yǎng)基中含有較多的明膠及硫酸銨,滅菌冷卻后應(yīng)搖勻立即在陰涼環(huán)境倒平板,使平板能夠快速凝固,制成的平板應(yīng)為均一渾濁不透明狀態(tài)。不可長時間在50℃左右保溫,培養(yǎng)基易凝固;傾注平板前必須搖勻且能保證倒好的平板能快速凝固,若制成的平板呈透明狀態(tài),通常是因培養(yǎng)基未搖勻或凝固過慢導(dǎo)致的。
四、生長現(xiàn)象及結(jié)果觀察
接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時:
質(zhì)控菌株 | 菌株編號 | 生長情況 | 其他特征 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC25923 | +++ | 菌落周圍有透明環(huán),產(chǎn)酸 |
表皮葡萄球菌 | CMCC26069 | +++ | 菌落周圍有透明環(huán),不產(chǎn)酸 |
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表皮葡萄球菌 | 金黃色葡萄球菌 |
發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸現(xiàn)象觀察:用棉簽除去平板上的菌落,在瓊脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液,可同時在無菌落生長的空白位置加1滴做為對照,若滴加的溴甲酚紫變黃,說明該菌可發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。