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Hyclone雙抗SV30010|暑期特惠
產(chǎn)品名稱:雙抗
品牌:Hyclone
貨號(hào):SV30010
規(guī)格:100ml
備注:-20度
蘇州千舍批發(fā)供應(yīng)hyclone液體培養(yǎng)基,Gibco胎牛血清,無外泌體血清,Gibco液體培養(yǎng)基,hyclone雙抗,Gibco胰酶,SERANA胎牛血清
GIBCO雙抗 15140-122 100ml
GIBCO胰酶 25200-056 100ml
GIBCO胰酶25200-072 500ml
Hyclone 雙抗 SV30010 100ml
Hyclone 胰酶 SH30042.01 100ml
暑期大促,除25200-072外,以上雙抗胰酶
滿十送一,滿十送一
研究者一般需要考慮兩種細(xì)胞培養(yǎng)污染:微生物細(xì)胞培養(yǎng)污染和其他細(xì)胞系的混入。 兩種污染都非常普遍,必須重視可能的污染以及污染對(duì)結(jié)果造成的影響。 應(yīng)根據(jù)各個(gè)研究者的需求和經(jīng)驗(yàn)來決定是否使用抗生素和抗真菌劑來防止污染。
我們生產(chǎn)了種類繁多的抗生素和抗真菌劑來控制細(xì)菌、真菌、支原體和酵母所造成的污染。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來消除或控制污染時(shí),必須要清楚對(duì)于特定的細(xì)胞系這些物質(zhì)可能是具有毒性的。 使用前,首先進(jìn)行劑量反應(yīng)試以確定于何種劑量等級(jí)即開始產(chǎn)生細(xì)胞毒性非常重要。
雙抗就是青鏈霉素混合液(100x) ,是專門用于細(xì)胞培養(yǎng)的,可以直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)。
雙抗起的作用:抗生素,抑制細(xì)菌生長;避免細(xì)胞污染。
加不加雙抗不是的,視實(shí)際情況而定。
如果你實(shí)驗(yàn)室條件足夠好,如果你操作足夠規(guī)范,就盡量不要加雙抗了。相反,如果你實(shí)驗(yàn)條件不夠,操作也沒有把握,還是加的好。好的方法是做個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)照,看有沒有必要加雙抗。
在細(xì)胞培養(yǎng)液中推薦的青霉素的工作濃度為100u/ml,鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。
如果加多了話對(duì)細(xì)胞毒性太大,細(xì)胞生長艱難。加入雙抗時(shí),一般先加在培養(yǎng)基里,因?yàn)槿绻侵苯釉趽Q液傳代滴加的話,那個(gè)雙抗的濃度實(shí)在不好控制。
誤區(qū):長期使用抗生素,以對(duì)抗污染。
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)常規(guī)使用抗生素。連續(xù)使用抗生素會(huì)促進(jìn)抗生素耐藥性細(xì)胞株的產(chǎn)生,導(dǎo)致輕度污染持續(xù)存在,一旦將抗生素從培養(yǎng)基中去除,這種輕度污染終將發(fā)展成大規(guī)模污染。
連續(xù)使用抗生素會(huì)掩蓋支原體感染及其他隱性污染,有些抗生素會(huì)與細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng),干擾你研究的細(xì)胞過程。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年。由于該試劑在4℃下長期存放是不穩(wěn)定的,應(yīng)分裝后在-20℃下避光保存。青霉素在2-8的℃存放時(shí)間不應(yīng)超過4天,鏈霉素相對(duì)穩(wěn)定一點(diǎn),在2-8℃可以存放30天左右。切記,雙抗從凍融后里面的基本成分已開始降解。
Hyclone雙抗SV30010|暑期特惠購買蘇州千舍細(xì)胞注意事項(xiàng):
一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;
收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
二、如為貼壁細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1. 未超過80%匯合度時(shí),用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意:換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。
四、細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
?。?)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
?。?)視具體情況而定。
五、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
?。?)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
?。?)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
?。?)視具體情況而定。
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Gibco液體培養(yǎng)基, MEM液體培養(yǎng)基,貨號(hào):C11095500BT
Gibco液體培養(yǎng)基, MEM液體培養(yǎng)基,貨號(hào):C11095500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,DMEM低糖培養(yǎng)基 貨號(hào): C11885500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,DMEM高糖培養(yǎng)基 貨號(hào): C11995500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,1640培養(yǎng)基 貨號(hào):C11875500BT
Gibco液體培養(yǎng)基,DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基 貨號(hào):C11330500BT
Gibco緩沖液 PBS7.4 貨號(hào):C10010500BT
Gibco 胰酶溶液 貨號(hào):25200-056 100ML
Gibco 胰酶溶液 貨號(hào):25200-072 500ML
Gibco 雙抗溶液 貨號(hào):15140-122
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脂質(zhì)體2000 原裝 GIBCO 11668-027原裝 0.75ml *
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★SIGMA試劑現(xiàn)貨3-5天
★Gibco各款血清:10099-141澳洲、16000-044北美、10270-106南美,10437-028墨西哥,10091-148新西蘭胎牛血清
★Hyclone各款血清:30084.03澳洲、30087.02南美、sv30087.03烏拉圭
★小牛血清,BI胎牛血清(04-001-1ACS、04-002-1A、04-400-1A)
★SIGMA血清(F2442),PAN(ST30-3302、ST30-2602)
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★Gibco培養(yǎng)基:C11995500BT(DMEM高糖)、C10010500BT(PBS)、C11875500BT(1640)
★Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01、SH300243.01、SH30265.01、SH30256.01
★公司常備現(xiàn)貨:lipo2000(0.75ml)11668-027、(1.5ml)11668-019
lipo3000(0.75ml)L3000-008、(1.5ml)L3000-015
RNAiMax(0.75ml)13778-075、(1.5ml)13778-150
trizol(100ml)15596-026、(200ml)15596-018
trizol LS(100ml)10296010、(200ml)10296028
B27 (10ML) 17504-044 胰酶(100ml)25200-056
雙抗(100ml)15140-122 西班牙瓊脂糖(100g)
羅氏潮霉素B 1g/20ml MERCK蛋白酶K(100g)
DMSO-二甲基亞砜(100ml)D2650 日本同仁cck8試劑盒
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