Exosome-depleted FBS無外泌血清

產(chǎn)品名稱：無外泌體血清

英文：Exosome-depleted FBS

品牌：SBI

規(guī)格：50ml

貨號：EXO-FBS-50A-1

Exosome-depleted FBS無外泌血清

一、外泌體簡介

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括腫瘤細胞在內(nèi)幾乎所有類型的細胞（免疫細胞、神經(jīng)細胞、干細胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。

Exosome內(nèi)含有與細胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細胞膜受體直接激活受體細胞，也可運輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細胞器進入受體細胞，參與細胞間通訊。Exosome在免疫應答、炎癥反應、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病治療。
miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子， 它可以通過外泌體從一個地方轉(zhuǎn)運到另外一個地方行使基因沉默功能。通過檢測外泌體中miRNA表達變化，可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能。

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貨品編碼 貨品名稱 規(guī)格

SH30024.01 MEM培養(yǎng)基 含EBSS，含L-谷氨酰胺 500mL

SV30010 雙抗 100mL

SH30809.01 RPMI1640培養(yǎng)基，含谷氨酰胺，不含硝酸鈣 500mL

SH30243.01 DMEM高糖，含L-谷氨酰胺，110mg/L丙酮酸鈉 500mL

SH30042.01 0.25%胰酶，不含鈣、鎂，液體 100mL

SH30021.01 DMEM低糖培養(yǎng)基   含L-谷氨酰胺，110mg/L丙酮酸鈉 500mL

SV30087.03 烏拉圭胎牛血清500mL 500mL

SH30406.05 新西蘭胎牛血清500mL 500mL

SH30265.01 α-MEM液體培養(yǎng)基 500mL

SH30028.02 Dulbecco’s磷酸鹽緩沖液   不含鈣、鎂、酚紅，1X 500mL

SH30022.01 DMEM高糖培養(yǎng)基，含L-谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉 500mL
二、外泌體研究的主要應用
外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了腫瘤的生長與侵襲。
腫瘤

• 腫瘤轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML）細胞的增殖、遷移和抑制細胞凋亡。
• 治療靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRAS G12D，從而特異性高效靶向至胰腺癌細胞，以顯著降低RAS活化、癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。

免疫

• β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外，并可轉(zhuǎn)移到其他代謝器官或免疫內(nèi)皮細胞，有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。

心血管

• 外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細胞導致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈粥樣硬化

分子標記

• 疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、病毒性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞癌中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。
• 預后標志。

細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是常用的血清，分為胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清，如廠家能做到這一點，新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。小牛血清，如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì)，其質(zhì)量明顯不如前兩種。

血清的質(zhì)量，種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長，而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同，尤其是對克隆細胞的生長，某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長的物質(zhì)。因此，在購買大量血清之前，必須對血清支持細胞生長能力進行檢測，然后再大量購買質(zhì)量好的同一批號的血清，并注意以下幾點：

（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ – -70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10％，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

（2）一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。

（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃ 進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。

（4）熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應有：細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。

（5）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量。

（6）血清中的沉淀物絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量?？捎秒x心3000rpm, 5 分鐘去除，也可不用處理。

（7）顯微鏡下“小黑點”：經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點”，常誤認為血清受污染。一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應立即停止使用，更換另一批號的血清。

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