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細(xì)胞流式EDU實驗
一、實驗介紹
一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)的摻入,并通過隨后的點擊反應(yīng)(Click reaction)使EdU被Alexa Fluor 488/647所標(biāo)記,從而實現(xiàn)簡單、快速、高靈敏地檢測細(xì)胞增殖的試劑盒。EDU加入培養(yǎng)基后,可做為細(xì)胞DNA復(fù)制的原料,經(jīng)過兩個細(xì)胞周期后,細(xì)胞中兩條單鏈均含EDU的DNA將占l/2,反映在染色體上應(yīng)表現(xiàn)為一條單體淺染。如經(jīng)歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細(xì)胞如果僅經(jīng)歷了一個周期,則兩條單體均深染。計分裂相中各期比例,就可算出細(xì)胞周期的值。
二、實驗?zāi)康?/span>
比BRDU更準(zhǔn)確快速的測定細(xì)胞增殖速度。
三、實驗步驟
四、實驗結(jié)果展示
五、送樣運輸要求:
活細(xì)胞樣本常溫運輸;
新鮮組織樣本需要浸泡在生理鹽水中4℃運輸;
客戶提供組織、細(xì)胞信息,不接收凍存樣本。
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