詳細(xì)介紹
DNA probes-Scorpions Primers
DNA probes-Scorpions Primers
Scorpions引物利用了一種單分子機(jī)制,該機(jī)制在溶液中的作用更快,可用于實(shí)時(shí)PCR中的瞬時(shí)熒光。與分子信標(biāo)類似,這些引物在PCR循環(huán)過(guò)程中不需要酶切探針。這些特性使Scorpions引物成為快速,實(shí)時(shí)PCR,終點(diǎn)PCR,SNP檢測(cè)和基因定量的有價(jià)值的工具。
Scorpions Architecture
Scorpions primers are probe/primer hybrids unlike other FRET probes, whose design is such that they emit light only when incorporated into the PCR product during amplification. These primers incorporate two distinct structures: 1) a target-specific DNA probing sequence and 2) a target-specific PCR primer.
DNA探測(cè)序列
DNA探測(cè)元件在3'和5'末端并入了一個(gè)自我互補(bǔ)的莖序列,該序列將目標(biāo)特定區(qū)域保持在發(fā)夾環(huán)中。 熒光團(tuán)分子與5'端共價(jià)連接,而深色淬滅劑(黑洞猝滅染料)與環(huán)結(jié)構(gòu)的3'端連接。 熒光團(tuán)和BHQ染料通過(guò)莖結(jié)構(gòu)保持緊密的物理距離,以確保在熱循環(huán)之前進(jìn)行有效的淬滅。
目標(biāo)特異性引物
靶特異性PCR引物通過(guò)封閉部分與DNA探測(cè)序列的3'端共價(jià)連接。 該部分防止聚合酶延伸到探測(cè)元件中,這可能表現(xiàn)為假陽(yáng)性。