在賽默飛色譜柱的使用中，我們會發(fā)現(xiàn)很多實驗室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。需要來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面：

　　泵頭密封圈的磨損；進樣閥轉子密封圈的磨損；析出的緩沖鹽；樣品中的復雜易吸附基質等等；其實，在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會有所改善，因為較低的PH系統(tǒng)會降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。

　　預防措施：

　　1、在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器

　　在線過濾器的內部顆?？障兑话闶?.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。所以，在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過濾篩板的堵塞。注意：但是對于非常低死體積的液相系統(tǒng)，在線過濾器的加入可能會導致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴重的問題。而對于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會有太大變化。

　　2、在柱子前端使用保護柱

　　保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因為它具有和分析柱相同的內部填料，所以保護柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質組分。注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統(tǒng)時請取下保護柱，以防止這些強保留組分被洗脫進分析柱。保護柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會對分離效果有影響。

　　3、對樣品進行凈化處理

　　有一些液相的分析方法沒有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進行過濾。在實際工作中，賽默飛色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：

　　4、使用時注意事項：

　　.為避免管路中的有機溶劑和氣泡進入色譜柱，先用水沖洗整個色譜系統(tǒng)，然后才能接入凝膠柱。

　　.不要讓有機溶劑進入柱中，否則會使填料脫水，導致柱床損壞，要小流速開啟泵，不要快速加大流速，以防止壓力迅猛升高而導致柱床損壞。15mm的柱子流速不要超過3ml/min。

　　.每次使用后務*蒸餾水沖洗干凈將含鹽的流動相置換干凈，若較長時間不用請按保存方法保存。

　　5、保存方法：

　　.將凝膠柱用蒸餾水沖凈后充上0.02%-0.05%的疊氮鈉水溶液封存，或三氯丁醇苯基汞代鹽將色譜柱封閉后低溫保存(溫度在5℃左右)在冰箱。

　　.再次使用時，用蒸餾水將保護溶液沖洗掉即可使用。

　　.如果次日還要使用也要從系統(tǒng)中取下，將賽默飛色譜柱封閉后存于4~8度的冰箱中冷藏。