目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>試劑盒>> 超敏 ECL 顯色試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
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通用型 ECL 顯色試劑盒
本產(chǎn)品是一種靈敏度高的化學(xué)發(fā)光試劑盒，基本原理是以 luminol 為基礎(chǔ)的化學(xué)發(fā)光；可與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase,HRP）發(fā)生反應(yīng)而發(fā)光，通過 X-光膠片曝光或其他成像方法（如熒光或化學(xué)發(fā)光成像儀）進(jìn)行檢測；低濃度樣本依然能夠檢測信號，節(jié)省樣本；低濃度抗體（一抗、二抗）孵育之后依然能夠檢測到信號，節(jié)省珍貴的抗體；相較于通用型ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒，信號值至少增強(qiáng) 10 倍，檢測靈敏度達(dá)到飛克級。
產(chǎn)品組分
A 液
B 液
運(yùn)輸與保存方法
常溫運(yùn)輸。頻繁使用可置于室溫保存，一年穩(wěn)定；長期不用，建議置于 4 oC 保存延長效期。
操作方法
使用 CCD 拍照：可以將膜放置于工作液中，開機(jī)后按照使用說明，將膜取出，進(jìn)行拍照。另外，也可以根據(jù)情況，調(diào)整機(jī)器測量參數(shù)，提高信噪比。
曝光方法
使用 CCD 拍照：可以將膜放置于工作液中，開機(jī)后按照使用說明，將膜取出，進(jìn)行拍照。另外，也可以根據(jù)情況，調(diào)整機(jī)器測量參數(shù)，提高信噪比。
注意事項(xiàng)
1）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）轉(zhuǎn)膜、封閉、孵育都需要避免氣泡，另外戴手套可以避免在膜上留下手印，保持膜的干凈。
3）長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。曝光不足則條帶模糊。
4）某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜
5）避免將多張膜置于同一個洗膜盒內(nèi)洗膜，相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。
6）使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。
7）使用生物素-親和素系統(tǒng)，避免使用牛奶封閉，可能會導(dǎo)致背景過高。
8）金屬氧化物顆?？赡軙斐赡ど铣霈F(xiàn)顆粒狀斑點(diǎn)，避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子，建議使用塑料的平頭鑷子。
9）疊氮*鈉（NaN3）能抑制 HRP 活性，若回收 HRP 標(biāo)記探針或者抗體應(yīng)避免使用 NaN3，如必需使用勿超過 0.01%。
10）本品無特殊毒性，按普通化學(xué)品處理。11) 本產(chǎn)品僅作科研用途!
問題與解決方案
| 遇到的問題 | 原因分析 | 推薦解決方法 |
| 膠片無條帶顯現(xiàn)或者信號較弱 | 轉(zhuǎn)膜的效率低 | 提高轉(zhuǎn)膜效率，用預(yù)染 Marker 判斷。 |
| 抗原/抗體量少或不匹配 | 增加抗原/抗體量或選擇合適抗原/抗體 | |
| X 光膠片有問題 | 曝光后 X 光譜全黑（而非透明色），則表明膠片已全曝光，使用新的 X 光片 | |
| 顯影/定影液有問題 | 可預(yù)先曝光一張膠片進(jìn)行判斷，如有問題當(dāng)換用新的顯影/定影液 | |
| 反應(yīng)系統(tǒng)中 HRP 量過多 | 稀釋 HRP 標(biāo)記物 | |
| X 光片背景臟 | 一抗二抗?jié)舛忍?/td> | 降低抗體濃度，延長封閉時間 |
| 抗體未清洗干凈 | 增加洗膜次數(shù) | |
| 條帶有空斑 | 抗原以及二抗的濃度過高 | 稀釋樣品重新跑膠，也可將混合好的顯色液冰浴后，加到膜上即刻快速顯色。 |
| 帶型不規(guī)則 | 轉(zhuǎn)膜有氣泡或甲醇（對于PVDF 膜）水化不均勻 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件。 |
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