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豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒

需自備的設(shè)備及試劑

1. 微量移液器： 0.5μl-10μl、10μl-100μl、100μl-1000μl。

2. 一次性移液器吸頭。

3. 量筒：500ml。

4. 96孔板酶標(biāo)儀。

5. 蒸餾水或去離子水。

6. 洗瓶或洗板機(jī)。

樣品制備

取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血。

洗滌液的準(zhǔn)備

豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫，如有鹽結(jié)晶，搖動(dòng)使結(jié)晶的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按1：100的體積比稀釋待檢血清。

注意：陰性和陽性對(duì)照不用稀釋。取每個(gè)樣品后都要更換吸頭，準(zhǔn)確記錄每個(gè)樣品在板上的位置。每個(gè)樣品在加入到包被板微孔前應(yīng)充分混勻。

豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒操作步驟

1. 取預(yù)包被的檢測板（根據(jù)樣品*，可拆開分次使用），將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照1孔，陽性對(duì)照2孔，取陰性及陽性對(duì)照各100μl分別加入反應(yīng)孔中輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）。

2. 蓋上封板膜（可按實(shí)際需要自行裁剪），置37℃溫育30分鐘。

3. 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，使用工作濃度洗滌液每孔加250ul，后甩去孔內(nèi)液體，以上步驟重復(fù)4-6次，*在干凈吸水紙上拍干。

4. 每孔加酶結(jié)合物50μl，蓋上封板膜，置37℃溫育30分鐘。

5. 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗滌4-6次, 方法同3。切記*在干凈吸水紙上拍干。

6. 每孔加顯色液100μl，輕微震蕩混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。

7. 每孔加終止液50μl，使反應(yīng)終止，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。

結(jié)果判定

用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值。

試驗(yàn)成立的條件是：

陰性對(duì)照（N）OD值<0.20，同時(shí)陽性對(duì)照（P）OD值>0.4。

計(jì)算方法：

樣品OD值÷陽性對(duì)照OD均值=S/P值

陰陽性判斷：

S/P值≥0.4判斷為陽性；

S/P值<0.4判斷為陰性。