Cat NO.: CL-0183

細胞名稱

PA317（小鼠成纖維細胞）

種屬

小鼠

年齡（性別）

胚胎

組織來源

胚胎

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

背景描述

PA317細胞源自TK-NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?，可能因為用于?gòu)建PA317細胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細胞。選擇后，PA317細胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個月。

生長培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號:PM150210)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO₂，5%

溫度：37℃

Cat NO.: CL-0183

細胞名稱

PA317（小鼠成纖維細胞）

種屬

小鼠

年齡（性別）

胚胎

組織來源

胚胎

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

背景描述

PA317細胞源自TK-NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?，可能因為用于?gòu)建PA317細胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細胞。選擇后，PA317細胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個月。

生長培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號:PM150210)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO₂，5%

溫度：37℃