T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品介紹：

 T7pLysY菌株為大腸桿菌BL21增強(qiáng)型菌株，為L(zhǎng)on和OmpT蛋白酶缺陷型，用于毒性或非毒性蛋白的表達(dá)。該菌株區(qū)別于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的優(yōu)勢(shì)在于T7 RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域，基因組中無(wú)λ前噬菌體序列，LysY表達(dá)的T7溶菌酶保留了對(duì)T7 RNA聚合酶的抑制作用但缺失了水解細(xì)胞壁的酰胺酶活性，有利于降低基因的背景表達(dá)和避免誘導(dǎo)過(guò)程中細(xì)菌的裂解，菌株具有抗T1噬菌體感染等特點(diǎn)。T7pLysY表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于10⁸cfu/μg DNA。

T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞基因型：fhuA2lacZ::T7gene1[lon]ompTgalsulA11R(mcr-73::miniTn10--Tet^S)2[dcm]R(zgb-210::Tn10--Tet^S)endA1D(mcrC-mrr)114::IS10 lysY (Cam^R)

菌株抗性：對(duì)氨芐青霉素，壯觀霉素，卡那霉素，鏈霉素和四環(huán)素敏感,對(duì)氯霉素有抗性。

T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存條件：-70℃保存，避免反復(fù)凍融。

T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞?操作說(shuō)明:

1.  取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。