BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細(xì)胞基因型：

F^–ompT hsdS(rB^– mB^–) dcm⁺ Tet^r galλ(DE3) endA Hte [argU proL Cam^r] [argU ileY leuW Strep/Spec^r]

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：

 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株來(lái)源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，從而減少對(duì)重組蛋白的降解，補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的4種稀有密碼子( AGA、AUA、CCC、CUA) 對(duì)應(yīng)的tRNA （argU、ileY、proL、leuW），提高外源基因，尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū)（DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶），可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)，同時(shí)具有四環(huán)素，氯霉素，鏈霉素，壯觀(guān)霉素抗性。
 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率高達(dá)10⁸cfu/μg。

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：

1.  取100μl冰上融化的 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

1.  將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1.   感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.  轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
4.  誘導(dǎo)時(shí)，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。

5. 為獲得需要量的蛋白，誘導(dǎo)時(shí)間，溫度，IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。

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