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技術(shù)文章

elisa試劑盒實驗繪制校準(zhǔn)曲線的方法

閱讀:6816          發(fā)布時間:2020-1-6

elisa試劑盒校準(zhǔn)曲線的繪制: 用一系列被測物標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟,將被測物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤?。制備好的?biāo)準(zhǔn)系列和空白,在方法選定的波長下,測定吸光度。已被測物濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制校準(zhǔn)曲線。1)對標(biāo)準(zhǔn)系列,溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測量后,應(yīng)先作空白校正,然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;2)標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測定,但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時,應(yīng)和試樣同樣處理后再測定。 3)校準(zhǔn)曲線的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號和貯存時間等實驗條件的改變而變動。因此,在測定試樣的同時,繪制校準(zhǔn)曲線zui為理想,否則應(yīng)在測定試樣的同時,平行測定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份,取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線上的相應(yīng)點核對,其相對差值根據(jù)方法精密度不得大于5%~10%,否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。

凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線的分析方法,都是在樣品測得信號值后,從校準(zhǔn)曲線上查得其含量(或濃度)。因此,繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線,直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外,elisa試劑盒校準(zhǔn)曲線也確定了方法的測定范圍。

 

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