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液質聯(lián)用儀測定水果和蔬菜中的殺真菌劑
閱讀：216 發(fā)布時間：2024-12-30摘要 本應用探討了新電噴霧儀器與液相色譜/飛行時間質譜 (LC/ TOFMS) 和液相色譜/離子阱質譜 (LC/ITMS) 用于分析水果 (蘋果,檸檬,瓜和桔子) 提取物和沙拉蔬菜 (西紅柿,菜花和柿子 椒) 中的五種主要殺真菌劑的可能性。包括不同水果和蔬菜基 質中五種主要殺真菌劑（多菌靈、噻苯咪唑、氧化偶氮烯酰碼啉、氟菌唑）的 LC/TOFMS 及 LC/ITMS MS/MS 譜 圖，TOF 實驗分子式，MS/MS 碎片及確認離子。給出了水果 及蔬菜中殺真菌劑的樣品快速前處理及萃取方法的詳細說明的 同時提供使用 TOF 和離子阱分析純溶劑和水果及蔬菜提取物中 殺真菌劑的檢出限 (LOD)、線性及定量的譜圖。最后是市售的 實際樣品水果及蔬菜：蘋果，桔子，檸檬和瓜中殺真菌劑的分 析結果。
介紹 本文描述了鑒別和定量分析水果及蔬菜中殺真菌劑的 重要性 [1, 2]。歐盟指南中愈來愈多地使用 LC/MS 分析許多常見的殺真菌劑，很快成為了法規(guī)監(jiān)測承認 的農藥殘留分析方法。LC/MS 尤其適用于極性和不 穩(wěn)定的各種殺真菌劑的分析。因此，LC/MS 方法比 傳統(tǒng)的 GC/MS 方法更加適合使用。比如，Pico 等人 對 MS 和 MS/MS 在食品中農藥（包括殺真菌劑）分 析的應用進行了綜述 [3]，目前有大致 100 篇文章涉 及食品中農藥分析的內容，其中大約 25 篇左右是使 用 LC/MS 的，多數文章在 2000 年初發(fā)表。因此， LC/MS 是食品分析的新興技術。然而，很有意思的 是，許多最近的文章中，沒有一篇使用 LC/TOFMS 和精確質量數分析食品中殺真菌劑。 所以，開發(fā)研究 LC/TOFMS 方法，以精確質量數分 析食品中的農藥顯得十分重要 [1, 2]。我們目前的研 究報告是最先使用最新的安捷倫 LC/MSD TOF 分析 食品中殺真菌劑的方法之一。選擇本主題的原因在于 這些殺真菌劑在蘋果，桔子，檸檬，瓜，西紅柿，菜 花和柿子椒中的大量使用。并且，LC/ITMS 也將作 為 LC/TOFMS 的比較方法用于分析水果及蔬菜中的 殺真菌劑。如何同時使用 LC/ITMS 方法細節(jié)也有描 述 [2]。
實驗方法 水果和蔬菜的提取 (QuEChERS) QuEChERS 是一種提取方法的縮寫，字母分別代表 快速，簡便，經濟，有效，持久和安全。該方法在食 品中農藥分析的快速提取方面得到廣泛的認可。是一 種提取方法的縮寫，字母分別代表快速，簡便，經濟， 有效，持久和安全。該方法在食品中農藥分析的快速 提取方面得到廣泛的認可。 1. 稱取 15 g 預先混勻的樣品于 40 mL 特氟龍離心管 中。加入 15 mL 乙睛（含 1% 乙酸），6 g 無水硫 酸鎂和 2.5 g 三水乙酸鈉，用旋渦振蕩器在最大速 度或手動振蕩樣品 1 min。然后，于 3700 rpm 離 心 3 min。 2. 取 5 mL 上層清液于 15-mL 試管中，加入 250 mg PSA 吸附劑及 750 mg 硫酸鎂，旋渦振蕩 20 s。 然后，于 3700 rpm 再次離心 3 min。將 1.0 mL 離心液轉入自動進樣瓶。然后將水果及蔬菜的提 取液殘留物蒸發(fā)至干并用 8/92% 的甲醇/水溶解。
安捷倫 LC/MSD TOF 方法 • LC 泵為安捷倫 1100 二元泵，使用標準安捷倫 1100 自動進樣器，進樣體積 50 µL • 色譜柱：ZORBAX® Eclipse XDB-C8, 4.6 mm× 150 mm，5 µm, 部件號 993967-906 • 流動相 A：乙睛；流動相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A，25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷倫電噴霧源 - LC/MSD TOF • 正模式 ESI，毛細管電壓 4000 V • 霧化器 40 psig，干燥氣 9 L/min，氣體溫度 300 °C • 裂解電壓 190 V，撇除器電壓 60 V，八級桿直流 電壓 37.5 V，八級桿 RF 電壓 250 V • 參考質量：m/z 121.0509 和 922.0098,分辨率： 在 m/z 922.0098 處為 9500±500，分析時在噴霧 器 2 連續(xù)恒流使用參比 A
安捷倫 1100 系列 LC/MSD 離子阱方法 • 為便于直接比較色譜峰，使用與安捷倫 LC/MSD TOF 一致的色譜方法 • LC 泵為安捷倫 1100，進樣體積 50 µL • 色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C8，4.6 mm× 150 mm，5 µm，部件號 993967-906 • 流動相 A：乙睛；流動相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A 25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷倫 1100 系列 LC/MSD 離子阱 • 正模式電噴霧離子源 (ESI) 毛細管電壓 3200 V • 霧化器 40 psig,干燥氣 9 L/min，氣體溫度 300 °C • 毛細管出口電壓 70 V • 離子滯留，計數 50,000 次
結果與討論 裂解及質量精度 圖 3 顯示了五種殺真菌劑的 LC 分離情況。樣品含加 入檸檬提取物的 0.125 mg/kg (ppm) 殺真菌劑。圖 3b 顯示了各個化合物的提取離子色譜圖。提取物窗 口很干凈，說明提取離子的質量精度很高，提取離子 窗口寬度可窄至 (0.02 amu) 100 ppm。圖 3 提取離 子的窗口為 0.1 amu。
當濃度低至 0.05 mg/kg 時，提取離子 (m/z 192， 202，346，388 和 404) 的色譜圖仍然很干凈，表明 精確質量數的重要性及其在很窄的窗口提供干凈色譜 圖的能力。在測定每個殺真菌劑的分子離子精確質量 時顯示精確質量的窗口。表 1 顯示了每個殺真菌劑在 0.50 mg/kg 濃度時的檢測結果，包括元素組成，精 確質量及誤差，分別以 mDa 和 ppm 表示。除烯酰 碼啉外，在所有水果和蔬菜介質樣品的分析中均獲得 了高于 2 ppm 的質量精度。