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Bio-Techne
中級會(huì)員 | 第7年

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單細(xì)胞分離的方法和技術(shù)亮點(diǎn)介紹

時(shí)間：2022/9/9閱讀：1057
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　　單細(xì)胞分離提取系統(tǒng)用于各種類型的單細(xì)胞分離培養(yǎng)、純化、檢測；獲得單克隆細(xì)胞；用于單細(xì)胞基因擴(kuò)增，用于單細(xì)胞測序等。
　　一、單細(xì)胞的分離方法：
　　1.機(jī)械法
　　首先輕輕地研碎葉片組織，然后再通過過濾以及離心純化細(xì)胞。相比于酶解法，機(jī)械法對細(xì)胞進(jìn)行分離有如下2個(gè)特點(diǎn)，分別是質(zhì)壁分離的情況不會(huì)發(fā)生與不會(huì)有酶對細(xì)胞造成傷害。
　　2.酶解法
　　利用果膠酶對植物的葉片進(jìn)行處理，使得細(xì)胞間的中膠層發(fā)生降解，從而使具有代謝活性的細(xì)胞被分離出來。用來分離細(xì)胞的果膠酶不但可以使中膠層發(fā)生降解，還可以使細(xì)胞壁軟化。所以在使用酶解法對細(xì)胞分離時(shí)，為了避免細(xì)胞脹裂，必須對酶溶液給予滲透壓保護(hù)。
　　二、技術(shù)亮點(diǎn)：
　　1.單細(xì)胞的證據(jù)可追溯性
　　在分離細(xì)胞前后的過程中，會(huì)連續(xù)拍取多張細(xì)胞圖片，證實(shí)克隆來自于單個(gè)細(xì)胞，這些圖片會(huì)根據(jù)孔板的位置進(jìn)行命名，并存儲(chǔ)在硬盤中，以便追蹤。
　　2.單細(xì)胞打印效率高，且適用于多個(gè)細(xì)胞系
　　分離快速，一個(gè)96孔板只需2-3min，且每個(gè)孔都有多張圖片證實(shí)為單細(xì)胞，該技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于在多種細(xì)胞的單細(xì)胞分離。
　　3.細(xì)胞無損傷，單細(xì)胞存活率高
　　細(xì)胞無需標(biāo)記染色，沒有激光損傷，沒有電壓的影響，直接進(jìn)行分離，所以細(xì)胞沒有任何損傷，分離后的細(xì)胞存活率高，克隆恢復(fù)率高。

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