單細(xì)胞培養(yǎng)分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng),由于細(xì)胞的增殖有可能形成大小不等的細(xì)胞團(tuán)塊或連接成片。如果兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞粘連在一塊或細(xì)胞碎片過(guò)多都將影響結(jié)果,進(jìn)而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。所以,制備合格的培養(yǎng)細(xì)胞單細(xì)胞懸液十分重要。
細(xì)胞間實(shí)現(xiàn)信號(hào)傳遞交流:采用三明治方式將 PET/PC 膜嵌在兩板之間,除了細(xì)胞本身,培養(yǎng)基中其他成分都可以自由通過(guò)PET/PC膜,達(dá)到細(xì)胞間信號(hào)傳遞交流的目的。單細(xì)胞培養(yǎng)配合10cm培養(yǎng)皿使用,適用于任何不同類(lèi)型細(xì)胞間的共培養(yǎng),培養(yǎng)皿底部的飼養(yǎng)層細(xì)胞可以為單細(xì)胞提供細(xì)胞生長(zhǎng)因子,促進(jìn)其生長(zhǎng)增殖。
首先,單細(xì)胞的克隆不一定會(huì)形成組織,組織是指具有相同的形態(tài),功能的細(xì)胞。一般在科技實(shí)驗(yàn)中,單細(xì)胞的克隆都是制成懸浮液。就是利用一定的培養(yǎng)液,培養(yǎng)。一段時(shí)間要使用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞分離開(kāi)。因?yàn)榧?xì)胞一定要附著在物體上才分裂(癌細(xì)胞除外,所以會(huì)轉(zhuǎn)移),但大量的細(xì)胞附著,相互接觸就會(huì)出現(xiàn)接觸抑制,就是細(xì)胞相互接觸就不分裂了。所以需要用胰蛋白酶處理,形成懸浮液,用于實(shí)驗(yàn)研究。
單細(xì)胞培養(yǎng)采用一個(gè)微量吸管,可輕松從培養(yǎng)中高、全自動(dòng)分選單個(gè)細(xì)胞,軟件自動(dòng)掃描載物臺(tái)上感興趣的區(qū)域,并自動(dòng)檢測(cè)熒光的細(xì)胞,幾秒鐘內(nèi)該系統(tǒng)就可以看到培養(yǎng)中標(biāo)明所檢測(cè)到細(xì)胞的地圖,軟件計(jì)算出訪(fǎng)問(wèn)所有檢測(cè)到的細(xì)胞路徑并使用微量吸管把它們分揀出來(lái)。被檢測(cè)到的細(xì)胞從培養(yǎng)皿中通過(guò)玻璃微量吸管被自動(dòng)拾取分揀出來(lái),您也可以手動(dòng)檢測(cè)細(xì)胞,手動(dòng)或自動(dòng)事后對(duì)其進(jìn)行分選。
我們證實(shí)了顯微鏡觀測(cè)到的無(wú)論熒光標(biāo)記還是未標(biāo)記的活細(xì)胞,在培養(yǎng)皿中都可以可通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)可視化地被自動(dòng)識(shí)別并拾取由一個(gè)計(jì)算機(jī)控制的微量吸移管固定到所述物鏡。細(xì)胞從培養(yǎng)皿中以每秒1細(xì)胞的速度可連續(xù)分選分揀1000個(gè),這種方法可以作為流式細(xì)胞分選降低到單個(gè)細(xì)胞具有非常高的選擇性,并開(kāi)啟了通過(guò)計(jì)算機(jī)可視化進(jìn)行在單細(xì)胞水平自動(dòng)操縱單細(xì)胞方式。
單細(xì)胞培養(yǎng)的高分辨率,即兩個(gè)細(xì)胞其中一個(gè)可以被選擇性地除去之間的小距離是50-70微米,正如我們?cè)谔囟▽?shí)驗(yàn)中使用的微量吸吮管。該設(shè)備將能夠自動(dòng)、輕松、高地收集分揀到的單細(xì)胞用于進(jìn)一步培養(yǎng),克隆,RNA或蛋白質(zhì)制備以及免疫組化制備后的分選固定細(xì)胞。
傳統(tǒng)的熒光活化細(xì)胞分選方法采用流式細(xì)胞術(shù)用來(lái)分選細(xì)胞,是分子基礎(chǔ)分選中普遍使用的方法。這種方法只能檢測(cè)具有熒光活性的細(xì)胞,不但細(xì)胞存活率低、純度低,而且極易破壞細(xì)胞組織。單細(xì)胞培養(yǎng)可以靈活的與各種類(lèi)倒置顯微鏡配合,安裝操作也非常簡(jiǎn)單。如果用戶(hù)已經(jīng)擁有自己的顯微鏡系統(tǒng),只需購(gòu)買(mǎi)標(biāo)準(zhǔn)配件就可以將現(xiàn)有的系統(tǒng)升級(jí)為一套多功能的細(xì)胞分選平臺(tái)。