五月婷网站,av先锋丝袜天堂,看全色黄大色大片免费久久怂,中国人免费观看的视频在线,亚洲国产日本,毛片96视频免费观看

Bio-Techne
中級會員 | 第7年

400-086-5580

Namocell單細胞分離儀應(yīng)用---單細胞測序

時間:2019/3/2閱讀:838
分享:

201811月,NamocellCZ-BiohubChan Zuckerburg Biohub)合作,在單細胞測序領(lǐng)域做出了新的嘗試。CZ-Biohub利用Namocell單細胞分離儀分選出目的B細胞,并且將其進行單細胞測序,為抗體新藥的發(fā)現(xiàn)邁出了重要一步。

單細胞RNA測序(scRNA-seq)作為一種全基因組測序的方式,在單細胞層面廣泛用于確定細胞類型和細胞變異的鑒定。Namocell單細胞分離儀可以通過細胞標記CD27以及一種細胞活性的染料,來分選出單個活的B細胞。通過分析分離后的單細胞基因表達情況,對比靜息記憶B細胞,可以從單細胞層面研究基因表達差異。

圖一,人的未成熟記憶B細胞在mCD40L-3T3中批量刺激培養(yǎng)6天。收集細胞并用CD27-PECellTracker Green進行細胞染色。通過Namocell單細胞分離儀篩選PE/FITC雙陽性的細胞,單細胞分選至96PCR板,分選前PCR板中已預(yù)先鋪好4ul/孔的裂解液。通過cDNA合成情況得出單細胞分選的比例為97%。接下來進行VHVL抗體可變區(qū)域(An=8)的特異性基因的擴增或者全轉(zhuǎn)錄組文庫制備;通過二代測序獲取序列,參照靜息記憶B細胞BCR抗體表達資料組進行對比分析(B);B細胞激活基因的差異(C);   整體基因升降規(guī)律(D)。每孔只有一組BCR轉(zhuǎn)錄物,以及通過Sanger測序確定的VHVL質(zhì)量,都充分說明了分入PCR管中的只有一個細胞。

上述實驗數(shù)據(jù)確定了分選出來的單細胞的效率,同時也驗證了通過實驗前期處理和設(shè)門標準得到的確定是激活的B細胞。更重要的是,來自分選后的單細胞的cDNA適用于后續(xù)的單細胞轉(zhuǎn)錄組文庫制備和免疫球蛋白輕重鏈可變區(qū)域的全長PCR。Namocell單細胞分離儀提供了一種全新的桌面式單細胞分選平臺,并且可以與下游單細胞測序分析無縫對接。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言