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2022-2-23 閱讀(2004)
Tris緩沖液對(duì)于大多數(shù)生物系統(tǒng)都是不錯(cuò)的選擇,因?yàn)樗?5°C時(shí)的pKa約為8.1,使其成為pH值為7–9的有效緩沖劑。此pH范圍適用于大多數(shù)生物過(guò)程。與更專(zhuān)業(yè)的緩沖液(例如HEPES)相比,Tris粉還便宜且堅(jiān)固。
有兩種制作Tris緩沖區(qū)解決方案的方法。
一、制備均處于所需濃度的Tris堿和Tris HCl溶液,然后將一種溶液(通常是Tris HCl)的等分試樣添加到另一種溶液(通常是Tris堿)中,同時(shí)監(jiān)控pH值直至獲得正確的pH值。實(shí)際上,很少這樣做。
二、制作大多數(shù)常用的Tris緩沖液的常用方法是僅從Tris基數(shù)開(kāi)始。將適量的Tris粉末溶于水,用HCl調(diào)節(jié)pH值,然后將緩沖液補(bǔ)足至所需體積。假設(shè)在調(diào)節(jié)pH值時(shí)沒(méi)有過(guò)沖,則該方法不會(huì)改變離子強(qiáng)度。但是,在過(guò)沖并用NaOH或用Tris HCl重新調(diào)節(jié)并用NaOH調(diào)節(jié)pH后,離子強(qiáng)度會(huì)發(fā)生變化。根據(jù)Tris緩沖區(qū)的預(yù)期用途,這種更改可能重要也可能不重要。