實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品名稱：小鼠胚胎成纖維細胞

產(chǎn)品英文：3T3-L1細胞

貨號：BJ-01X1641

細胞培養(yǎng)條件：DMEM（含NAHCO3 1.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

雞可溶性間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒支鏈淀粉2-丁炔 98%穿心蓮內(nèi)酯  98%

雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 支鏈淀粉2-丁炔乙酯 98%熊果苷 99%

雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 支鏈淀粉針頭式過濾器 孔徑:0.22μm 直徑：13.0mm 800個/箱,100個/每包扁桃苷 97%

雞表皮生長因子(EGF)試劑盒 支鏈淀粉苯酰 98%扁桃苷 分析標準品，>98%

雞表皮生長因子(EGF)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 AR，99.0%氫  分析標準品，98%（HPLC)

雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 CP,98%氫  98%

雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒 直鏈淀粉1-萘 分析標準品牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)

雞生長激素(GH)試劑盒 馬鈴薯淀粉1-萘酚 AR，99.0%牛蒡子苷 分析標準品，>98%

雞生長激素(GH)試劑盒 馬鈴薯浸出粉硫代硫鈉，五水 AR,99% 分析標準品

雞乙酰乙檢測(ACAC)試劑盒馬鈴薯浸出粉5-氨-2-三氟苯 98%積雪草  98%

雞乙酰乙檢測(ACAC)試劑盒馬鈴薯浸出粉2-氟芐溴 97% 分析標準品，≥97%

雞傳染性鼻炎抗體(IC)試劑盒可溶性淀粉3-氟芐溴 95%土木香內(nèi)酯 分析標準品，≥97%(HPLC)

雞傳染性鼻炎抗體(IC)試劑盒可溶性淀粉(三氟氧)苯 99%異補骨脂素 分析標準品，>98%

雞透明質(zhì)(HA)試劑盒糊精4-(三氟氧)苯 97%蘆薈寧 分析標準品，≥99%

雞透明質(zhì)(HA)試劑盒α-環(huán)糊精烯酰氧三(三硅氧烷)硅烷 97%脫水羊藿素 分析標準品,≥99%(HPLC)

雞硫類肝素(HS)試劑盒α-環(huán)糊精過氧化二異苯 CP,98%硫辛 98%
3T3-L1細胞桉糖

出芽短梗孢糖

多縮木糖

果糖

花楸糖

烏來糖

聚乙酰氨葡糖

殼二糖

漏蘆糖