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人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:39:20瀏覽次數(shù):266

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 視網(wǎng)膜組織
人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A大鼠肝細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLBRL-3A大鼠肝細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLC6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLC6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLC6+LUC大鼠腦膠質(zhì)瘤綠色熒光標(biāo)記細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

視網(wǎng)膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,兩層間在病理情況下可分開(kāi),稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專(zhuān)司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專(zhuān)管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來(lái)越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),還能參與多種病理過(guò)程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法和胰dan白反復(fù)消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6結(jié)合蛋白抗體 細(xì)胞角蛋白6C封閉多肽 人超氧化物歧化(SOD)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng): Annexin V 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4封閉多肽 人二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)ELISA Kit

鈣粘蛋白15抗體 JMJD4蛋白封閉多肽 人組織蛋白去乙酰化(HD)ELISA試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體 神經(jīng)元特異性烯醇化/γ 烯醇化封閉多肽 人甲基化(Methylase)試劑盒 ELISA

ras基因相關(guān)蛋白R(shí)AB7樣蛋白1抗體 GAGE12H蛋白封閉多肽 人抗酒石性磷5b(TRACP-5b)ELISA檢測(cè)試劑盒

CD36抗體 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70封閉多肽 人磷肌醇3激(PI3K)ELISA Kit

ILDR2蛋白抗體 精子細(xì)胞堿性蛋白1樣蛋白封閉多肽 人蛋白激B(PKB)ELISA試劑盒

血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 免疫相關(guān)GTPase家族M蛋白1封閉多肽 人血紅氧合2(HO-2)試劑盒 ELISA

二氫葉還原抗體 G蛋白偶合受體激2封閉多肽 人激M2型同工(M2-PK)ELISA檢測(cè)試劑盒

NDUFB10蛋白抗體 腫瘤/睪丸抗原50封閉多肽 人甲狀腺過(guò)氧化物(TPO)ELISA Kit

PEST含核蛋白抗體 KLHDC3蛋白封閉多肽 人αL巖藻糖苷(AFU)ELISA試劑盒

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白11抗體 4型冰結(jié)構(gòu)蛋白LS-12-like (Danio rerio) 蛋白封閉多肽 人內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)試劑盒 ELISA

甲狀腺過(guò)氧化物抗體 巖藻糖1磷鳥(niǎo)苷酰轉(zhuǎn)移封閉多肽 人血紅氧合1(HO-1)ELISA檢測(cè)試劑盒

突觸足蛋白2抗體 纖維蛋白溶原封閉多肽 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)ELISA Kit

CD39樣蛋白2/ENTPD6抗體 G蛋白結(jié)合蛋白7封閉多肽 人磷脂A2(PL-A2)ELISA試劑盒

細(xì)胞角蛋白77抗體 跨膜蛋白87A封閉多肽 人一氧化氮合成(NOS)試劑盒 ELISA

高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 突觸足蛋白封閉多肽 人端粒(TE)ELISA檢測(cè)試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體 磷化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白封閉多肽 人基質(zhì)金屬5(MMP-5)ELISA Kit
人視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠子宮成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠子宮成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠卵泡膜細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠卵泡膜細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng):大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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