詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 牙周膜組織 |
商品詳細(xì)介紹:
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內(nèi);牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞(PLFs)作為牙周膜的主體細(xì)胞,是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程。現(xiàn)在,利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
5.方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 胰dan白聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; |
配對(duì)盒基因1抗體 重組人β2-微球蛋白蛋白
整合樣金屬與樣3蛋白抗體 Ki67蛋白封閉多肽
短蛋白聚糖抗體 重組人CHI3L1蛋白
三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體 絲/蘇氨蛋白質(zhì)激II α封閉多肽
ELMOD2蛋白抗體 鋅指蛋白134封閉多肽
磷化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(CD331)抗體 粘蛋白15封閉多肽
泛樣蛋白抗體 HTF9C蛋白封閉多肽
二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體 DHX37蛋白封閉多肽
KIAA1467蛋白抗體 ATP依賴RNA解旋DDX52封閉多肽
卵透明帶糖蛋白2抗體 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1封閉多肽
葡萄膜自身抗原Uaca抗體 血管緊張?jiān)忾]多肽
類固醇受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC31B封閉多肽
液泡蛋白分選蛋白28抗體 長(zhǎng)壽相關(guān)基因lASS4封閉多肽
防御β-108B/β-defensin 108B抗體 雄激受體相互作用蛋白4封閉多肽
微管卷曲蛋白SYNC抗體 重組人微管相關(guān)蛋白Tau-4
4-磷磷脂酰肌醇5激1樣蛋白抗體 磷化KLF5封閉多肽
MX1抗體 白細(xì)胞介-7受體a封閉多肽
蛋白激Aγ抗體 磺酰脲類藥物受體1封閉多肽
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
DMEM高糖 (含HEPES、雙抗,不含鈉)500mL-
Leibovitz's L-15(含L-丙氨酰-L-)500mL-
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-415細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-415細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-415細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
McCoy's 5A(不含L-)500mL-
MCF-7/Taxol細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MCF-7/Taxol細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MCF-7/Taxol細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MCF-7/Taxol細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MCF-7/Taxol細(xì)胞的體外培養(yǎng)。