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大鼠精原細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 14:46:26瀏覽次數(shù):313

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 睪丸組織
大鼠精原細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLPC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLPC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLPC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLRBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠精原細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

睪丸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自睪丸組織;睪丸呈微扁的卵圓形,表面光滑,覆蓋著鞘膜臟層;深部是質(zhì)地堅韌的白膜,在睪丸后緣增厚并進(jìn)入睪丸,形成睪丸縱膈,縱膈發(fā)出許多睪丸小隔深入睪丸實(shí)質(zhì),將實(shí)質(zhì)分為睪丸小葉,數(shù)量約為100~200。每個小葉內(nèi)約有2~4條生精小管,具有產(chǎn)生精子的作用;生精小管之間的結(jié)締組織中有睪丸間質(zhì)細(xì)胞,具有產(chǎn)生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),精直小管進(jìn)入睪丸縱膈形成睪丸網(wǎng),之后睪丸網(wǎng)發(fā)出12~15條輸出小管通過睪丸后上緣進(jìn)入附睪。生精小管的生精上皮是精子產(chǎn)生的地方,由生精細(xì)胞和支持細(xì)胞構(gòu)成,成人的生精小管有30~70cm長。精子的產(chǎn)生過程包括生精細(xì)胞的分化、支持細(xì)胞的作用、雄激素的調(diào)節(jié)等。生精細(xì)胞并不是一種細(xì)胞,它是多種細(xì)胞的統(tǒng)稱,包括精原細(xì)胞、初級精母細(xì)胞、次級精母細(xì)胞、精子細(xì)胞、精子。前者依次發(fā)育分化為后者,且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,終形成精子進(jìn)入到管腔之中,并借助生精上皮外側(cè)的肌樣細(xì)胞的收縮作用向下一級管腔移動。精原細(xì)胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細(xì)胞經(jīng)過多次有絲分裂而形成的細(xì)胞。原始的胚細(xì)胞經(jīng)分化形成精原細(xì)胞,精原細(xì)胞經(jīng)復(fù)制形成初級精母細(xì)胞,初級精母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后形成次級精母細(xì)胞,再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂形成精細(xì)胞。精細(xì)胞經(jīng)過變形終形成精子。精原細(xì)胞屬于雄性生殖細(xì)胞的早期發(fā)育階段,能不斷地進(jìn)行有絲分裂,增加細(xì)胞數(shù)量,并分化為精母細(xì)胞。精原細(xì)胞貼近基膜,細(xì)胞呈圓形,核大而圓,梁色深。精原細(xì)胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,通過精原細(xì)胞的分裂和分化,由精原細(xì)胞產(chǎn)生精母細(xì)胞,進(jìn)入成熟分裂,因而通過增殖可大大增加精母細(xì)胞的數(shù)量。按理論推算,一個精原細(xì)胞通過數(shù)次細(xì)胞分裂,可形成上百個初級精母細(xì)胞。但在生精過程早期,生精細(xì)胞很易發(fā)生變性,故實(shí)際上少于這個數(shù)字。在精原細(xì)胞的增殖過程中,有一部分Ad型精原細(xì)胞不再繼續(xù)分裂,而是保留下來,成為新的精原干細(xì)胞,因此通過增殖不僅能使精原干細(xì)胞不斷得到更新,且能使精原干細(xì)胞保持一定數(shù)量,從而使精子的產(chǎn)生持續(xù)地進(jìn)行下去,不會枯竭。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合多步消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)AP(堿性磷酸)免疫組化染色鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  圓形、橢圓形

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鋅指蛋白379抗體 微管相關(guān)腫瘤抑制蛋白2封閉多肽 人假定蛋白LOC677168 ELISA檢測試劑盒

相關(guān)易位膜蛋白2抗體 間充質(zhì)同源盒蛋白1封閉多肽 人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA Kit

ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒

高密度脂蛋白抗體 異質(zhì)核核糖核蛋白U樣蛋白1封閉多肽 人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)試劑盒 ELISA

型纖溶原激活因子受體(CD87)抗體 巢蛋白1封閉多肽 人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA檢測試劑盒

磷化蛋白激PKMYT1(Ser83)抗體 FIGNL2蛋白封閉多肽 人類似cDNA順序BC027382 ELISA Kit

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子19抗體 蛋白裂解3封閉多肽 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA試劑盒

3號染色體開放閱讀框20抗體 磷化有絲分裂激B封閉多肽 人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)試劑盒 ELISA

細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 地中海熱蛋白MEFV封閉多肽 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA檢測試劑盒

快速周期調(diào)節(jié)蛋白SPDYE1抗體 琥珀裂解封閉多肽 人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA Kit

KB抑制蛋白激β抗體 刺激分子B7-1蛋白封閉多肽 人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒

溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體 跨膜蛋白175封閉多肽 人肌抑(MSTN)試劑盒 ELISA

神經(jīng)囊泡膜蛋白1抗體?、笮屠w維連接蛋白域蛋白8封閉多肽 人黑瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA檢測試劑盒

抑癌基因SNF2β抗體 穿膜蛋白DLK1封閉多肽 人二磷尿核苷葡糖醛基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)ELISA Kit

17號染色體開放閱讀框97抗體 碳酐11封閉多肽 人蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒

促甲狀腺β亞單位抗體 細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3封閉多肽 人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)試劑盒 ELISA

外周蛋白2抗體 磷化B-Raf封閉多肽 人鳥苷解離抑制因子(GDI) ELISA檢測試劑盒

突觸后蛋白CRIPT抗體 乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白封閉多肽 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B) ELISA Kit
大鼠精原細(xì)胞大鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞英文名稱:大鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠淋巴管成纖維細(xì)胞英文名稱:大鼠淋巴管成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠骨髓肥大細(xì)胞英文名稱:大鼠骨髓肥大細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠骨髓單核細(xì)胞英文名稱:大鼠骨髓單核細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠脾淋巴細(xì)胞英文名稱:大鼠脾淋巴細(xì)胞5×105不提供細(xì)胞鑒定報告

大鼠骨髓巨噬細(xì)胞英文名稱:大鼠骨髓巨噬細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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